摘要:

摘要:为评价在大菱鲆育苗生产中添加外源益生菌对生物饵料轮虫和卤虫微生物菌群结构的影响，运用基于illumina HiSeq平台的高通量测序技术对添加益生菌和按照生产流程正常强化的轮虫、卤虫进行了菌群结构的分析和对比。添加外源益生菌的实验组轮虫和卤虫中的菌群物种多样性均明显高于对照组。在轮虫强化过程中，不同时期的对照组样品中菌群结构差异较明显，优势细菌种类变化较大。而添加外源益生菌后的各时期实验组轮虫菌群结构很相似，优势菌群的种类更为丰富，Lactococcus sp.、Pseudoalteromonas sp.和Alteromonas sp.等一直是各实验组中的优势细菌。在卤虫强化过程中，各对照组样品的菌群结构高度相似，优势细菌Cobetia sp.的相对丰度高达54%~65.2%。而在添加益生菌后，各实验组中的菌群结构仍高度相似，但Cobetia sp.的比例下降至4.3%~25.3%，最优势的细菌为Pseudoalteromonas sp.和Alteromonas sp.等几种，菌群结构中的物种均匀度更好。研究表明，在轮虫和卤虫强化过程中添加外源益生菌，能够改变生物饵料的菌群结构，使生物饵料中的细菌种类均匀度更好，并使菌群结构趋于稳定。

摘要:为探明三疣梭子蟹“黄选1号”在盐度胁迫过程中血清生化指标的变化规律及特点，进而了解盐度适应过程中能量代谢机制，设置5、10、20和50共4个盐度组，以自然海水（盐度30）为对照组，进行三疣梭子蟹“黄选1号”盐度胁迫实验。结果显示，实验组血清葡萄糖（GLU）、甘油三酯（TG）和总蛋白（TP）含量总体表现为先降低后稳定并显著低于对照组，对照组血清GLU、TG和TP含量在0~72 h内基本稳定，在整个盐度胁迫过程中，实验组血清GLU、TG和TP含量达到基本稳定后表现为与对照组盐度差值越大其含量降幅越大的特点。同一实验组三疣梭子蟹血清GLU和TP含量的最大降幅比TG含量的最大降幅大。各实验组血清GLU含量在0~9 h迅速降低，而血清TG和TP含量迅速降低发生在0~12 h。血清TP含量的最大降幅在盐度20实验组，但低于血清GLU含量最大降幅，在盐度5、10、50实验组内血清TP含量最大降幅高于血清GLU含量最大降幅。实验组血清尿素（UREA）含量总体表现为先升高后稳定并显著高于对照组，与血清GLU、TG和TP含量的变化趋势相反。盐度5和50实验组血清UREA含量相近，而血清TP含量则在盐度10与50实验组内相近。研究表明，三疣梭子蟹血清中GLU、TG和TP均与渗透压调节密切相关，在盐度适应过程中血清GLU和TP是三疣梭子蟹渗透调节的主要供能物质且血清GLU首先代谢供能，不同盐度下三疣梭子蟹血清GLU与TP对渗透调节供能占比有所不同，高盐环境中三疣梭子蟹血清自由氨基酸含量的部分增加可能来源于其他组织。

摘要:设计了氨苄青霉素、硫酸庆大霉素和卡那霉素3种抗生素的不同组合处理坛紫菜叶状体，旨在筛选出坛紫菜叶状体藻际微生物的最优去除方法；同时，探究紫菜叶状体生长与微生物群落变化之间的关系。结果显示，低浓度（10 μg/mL）的硫酸庆大霉素或高浓度（800 μg/mL）的卡那霉素处理，对坛紫菜叶状体生长均具一定的抑制作用，而不同浓度的氨苄青霉素处理均促进了叶状体生长。500 μg/mL的氨苄青霉素、500 μg/mL的硫酸庆大霉素与300 μg/mL的卡那霉素3种抗生素混合处理叶状体24 h，不会抑制叶状体的生长；同时，对藻际微生物有较强的抑制性。不同的坛紫菜品系，不同的叶状体日龄和培养密度，以及在不同的海水盐度和不同浓度的营养盐中培养，抗生素处理组圆盘体的生长均比对照组快。通过比较抗生素处理组与对照组分离的菌株后发现，抗生素处理组有两株菌落形态和菌株形态与对照组显著不同的特有菌株。研究表明，在坛紫菜叶状体的生长过程中，某些对叶状体生长起阻碍作用的细菌如果大量繁殖，会抑制对叶状体生长有益的细菌繁殖，当用抗生素抑制了阻碍生长的细菌，就会使益生菌成为优势菌，促进叶状体的生长，益生菌对上述抗生素的处理不太敏感，但由于培养条件的改变，抗生素对阻碍生长的细菌的抑制作用会减弱，使得它们大量繁殖，从而抑制叶状体的生长。

摘要:杀香鱼假单胞菌是大黄鱼内脏白点病的致病菌，感染该菌常会导致养殖大黄鱼很高的死亡率和严重的经济损失。病原株NB2011编码典型的Ⅲ型分泌系统，可能是该菌重要的毒力因子，ExsA是控制此分泌系统表达的重要调控蛋白。为确认ExsA在NB2011致病过程中的作用，开发有效疫苗，实验采用双交换同源重组法构建了ExsA内部序列被卡那霉素基因替换的突变株，检测突变株与野生株对鼠巨噬细胞J774的黏附、内化和胞内增殖特性，并比较对大黄鱼的毒力变化，同时，通过透射电子显微镜观察人工感染后大黄鱼内脏组织的病理变化。研究表明，巨噬细胞对突变株的内化率降低，内化的细菌在12 h内被清除，野生株在内化后虽然一段时间内数量稍有下降，12~24 h期间数量急剧上升；突变株对大黄鱼的96 h LD₅₀为2.59×10⁷/mL，比野生株高数百倍；电镜切片中未观察到组织内有菌体的存在，表明突变株的毒力明显减弱，可以作为弱毒疫苗的开发对象。

摘要:为比较鱼源乳酸菌表达系统口服疫苗在不同免疫程序下诱导鱼免疫应答水平的差异，确定鱼源乳酸菌表达系统口服免疫虹鳟幼鱼的免疫程序。本研究构建了重组表达IPNV VP2-VP3蛋白的鱼源植物乳杆菌L1212，将重组菌pPG612-VP2-VP3/L1212包裹颗粒饲料，口服免疫虹鳟幼鱼。免疫程序分为连续免疫组、免疫1 d后间隔1 d再免疫1 d组、连续免疫4 d后32 d加强免疫1次组和间隔免疫后32 d加强免疫1次组。免疫后进行尾动脉采血，间接ELISA方法检测各组血清抗体效价，免疫接种66 d后，腹腔注射IPNV，计算各组相对免疫保护率。确定颗粒饲料按照1 mL/g比例与108 CFU/mL重组菌pPG612-VP2-VP3/L1212和2.5%海藻酸钠混合，于20℃烘干制备口服疫苗。间隔免疫组血清抗体效价和攻毒保护率均显著高于其他组，并且免疫2次的间隔免疫组的血清抗体效价和攻毒保护率均显著高于免疫1次间隔免疫组。采用重组菌包被颗粒饲料饲喂虹鳟幼鱼，间隔免疫的免疫程序和免疫保护率优于连续免疫的免疫程序，对IPNV的入侵起到保护作用。

摘要:柔鱼冬春生群体广泛分布于西北太平洋，其种群分布与大小受气候变化和环境因子调控。本实验根据中国鱿钓组提供的1995-2011年渔业捕捞数据和海洋环境数据包括海表温度（SSTA）、海表面高度（SSHA）和混合层深度（MLDA）的距平值，分析不同气候模态下（PDO暖期和PDO冷期）柔鱼渔场环境的变化。结果显示，PDO暖期时，柔鱼CPUE高；PDO冷期时，CPUE变低。柔鱼渔场SSTA、SSHA和MLDA年间变化显著，各环境变量的时间变化与PDO冷暖相位对应。SSTA和SSHA与PDO指数负相关，滞后时间分别为-9~10月和-20~17月，且均在0月时相关系数最大；而MLDA与PDO指数呈正相关，滞后时间为-6~5月，在-1月相关系数最大。利用经验正交函数分析了SSTA、SSHA和MLDA时空变化的主要模态，前5个模态特征向量分别反映了西北太平洋柔鱼渔场SSTA、SSHA和MLDA分布场78.73%、32.82%和64.57%的信息。研究表明，气候模态变化驱动柔鱼渔场环境的变化，进而对西北太平洋柔鱼资源丰度产生显著影响。

摘要:microRNA是一种大小为18~25个核苷酸的非编码RNA，调控靶基因的转录后表达，广泛参与多种生理过程。本研究简要综述了microRNA生物学特性、转录后调控机制，详细讨论了第二代测序技术的相关应用、microRNA在鱼类中的表达模式、功能研究，包括渗透压调节、生殖、发育、生长、免疫、代谢等。现有的研究表明，miR-200和miR-30具有调控血浆离子浓度和渗透压平衡的功能；Dicer1是胚胎发育所必需的，在原肠胚时期，miR-20a调节头、眼、脊柱、体节的形态发生，miR-92调控内胚层的形成，miR-10影响体轴形成，miR-219影响头部和尾部细胞的凋亡；miR-122、miR-30、miR-145分别影响肝细胞成熟、肝胆管和肠道发育，miR-138和miR-143调控心脏发育，miR-126、miR-150、miR-451调控血小板、血细胞的发育和成熟，miR-10和miR-126影响血管生成，miR-200、miR-183分别影响嗅觉、听觉系统的发育，多个microRNA参与视网膜、肌肉、鱼鳍、肝脏等器官的再生；miR-133a/b、miR-206抑制肌肉细胞分裂，miR-214、miR-499、miR-199、miR-3906调控快肌纤维和慢肌纤维的生成；miR-430促进原始生殖细胞的生成；多个microRNA参与到禁食和再投喂调控的分解代谢和合成代谢平衡；此外，microRNA通过对免疫因子的调控参与到先天免疫、低氧适应、体色调控、应激反应、肌间刺形成等生理过程中。本研究通过对这些结果进行总结和讨论分析，将有助于对鱼类microRNA研究领域现状的了解和把握，促进鱼类非编码RNA研究的深入。

摘要:为探究福建中部近海鱼类生态类群组成的季节变化，采用非线性多维标度（NMDS）和相似性检验（ANOSIM）方法，依据2009年冬季、2010年春季和夏季于福建中部近海3个航次的海洋综合调查资料，对该海域鱼类的种类组成和生态类群结构进行分析。结果显示，冬季出现鱼类40种，生态类群以暖水种为主，但暖温种比例为3个季节中最高（30%），且暖温种占该季鱼类总质量和总尾数比例分别为17.65%和16.96%。春季出现鱼类39种，生态类群以暖水种为主，分别占该季节鱼类总质量和总尾数的86.48%和94.52%。夏季出现鱼类61种，暖水种占绝对优势（56种），分别占该季鱼类总质量和总尾数的97.17%和99.35%。受浙闽沿岸流和台湾海峡暖流的交替影响，从冬季到夏季物种更替率逐渐升高，暖水种种类数和数量密度不断上升，并伴随着河口种消失、外海种出现。此现象与冷、暖水团交替影响这一海域时，鱼类进行相应的产卵、索饵及越冬洄游等有关。研究表明，福建中部近海鱼类生态类群和种类组成的季节变化可能由水团不断变化所导致。

摘要:为研究长江口鳗苗捕捞量与生态因子的相互关系，于2012年汛期对长江靖江段鳗苗的捕捞量进行了监测，采用广义可加模型（GAM）对日捕捞量与水温、潮差、气压、浑浊度等生态因子之间的相关性作了分析。结果显示，靖江段鳗苗汛期为1月下旬-4月上旬，单船总捕捞量为221~443尾，平均（344.8±83.4）尾。1月均值仅0.4尾/d，且空网率高达90.9%；4月为旺汛期，均值10.4尾/d，空网率仅为10.0%。GAM模型显示，潮汐周期-月份交互项、水温和潮差对鳗苗日捕捞量的影响显著，而气压、浊度和月相周期对鳗苗日捕捞量的影响不显著。潮汐周期-月份交互项、水温和潮差对鳗苗日捕捞量的偏差解释率分别为42.4%、19.1%和13.1%，均呈现正相关关系。统计也显示，日捕捞量表现出上、下弦月较低、新月或满月前后较高的半月周期波动。鳗苗捕获的最低水温为6.3℃，而10~15℃为适宜捕捞水温。高潮期和低潮期分别占总捕捞量的76.8%和23.2%。研究表明，长江口鳗苗在借助潮汐流而快速溯河的过程中，部分在口门水域即被捕获，部分滞留在了长江河口段，而影响鳗苗溯河的重要生态因子是潮汐和水温。

摘要:2014年5月21-23日和27日在南沙群岛中部海域开展灯光罩网作业的同时，开展诱集前后中小型浮游动物群落变化的初步实验，研究浮游动物群落对灯光反应的敏感性，灯光对群落产生了较为明显的生态学效应。诱集前后共出现浮游动物178种，隶属16个类群。诱集后种类数增加，种类组成的更替率为41%。各类群中，除枝角类外其余15个类群在诱集前后出现的种类均发生变化；除原生动物在诱集后种类数下降外，其他类群的种类数均呈增加的趋势。浮游动物绝大部分类群对灯光诱集较为敏感，趋光性有正有负。诱集前后浮游动物优势种组成发生一定的变化，更替率为50%。诱集前优势种以桡足类为主，而诱集后有尾类的优势地位明显增强。诱集后浮游动物优势种优势度和出现频率均呈明显降低的趋势。南沙群岛海域中小型浮游动物优势种诱集前后均呈聚集分布，各优势种对灯光反应敏感，不同种类对灯光的适应性有所差异。住囊虫等大部分种类对灯光的适应性较强，诱集后聚集强度明显增加；而驼背大眼水蚤和活泼大眼剑水蚤诱集后聚集强度明显下降。桡足类幼虫和小纺锤水蚤等诱集后，聚集强度明显上升，之后又大幅下降。浮游动物生物量和栖息密度在诱集后总体呈明显的增加趋势，以诱集初期增幅最大，之后数量虽有所降低，但仍高于诱集前。灯光可使浮游动物物种丰富度和多样性水平明显提高，但尚未改变浮游动物的群落结构。浮游动物对人造光反应的种间和类群间差异，是由生物自身的生理特征和不同的摄食策略决定的。诱集后游泳生物摄食强度提高，导致了诱集后期浮游动物数量下降。

摘要:为研究叶黄素对七彩神仙鱼体色和生长的影响，在“牛心汉堡”饲料中分别添加0、50、100、200、300和400 mg/kg叶黄素，饲喂初始平均体质量（10.3±0.3） g的七彩神仙鱼8周。结果显示，添加叶黄素50~200 mg/kg，对鱼体增重率无显著影响，但添加量达200 mg/kg后，饲料系数显著增大，添加量达300 mg/kg后，增重率显著降低。在养殖4周、8周时，鱼体皮肤亮度（L^*）无显著变化，皮肤黄度（b^*）和叶黄素含量随叶黄素添加量增加而显著升高；8周时，各叶黄素添加组的皮肤b^*值和叶黄素含量显著高于4周时，当叶黄素添加量达300 mg/kg后，皮肤b^*值（4周、8周）和全鱼叶黄素含量（8周）趋于稳定；4周时，各处理组间的皮肤红度（a^*）无显著差异；8周时，当叶黄素添加量达100 mg/kg后，皮肤a^*值显著降低；饲料中添加300 mg/kg叶黄素显著提高了七彩神仙鱼肝脏总抗氧化能力。研究表明，在饲料中添加叶黄素可有效改善七彩神仙鱼体表黄色，提高肝脏总抗氧化能力，但高添加量的叶黄素会降低鱼体生长性能，七彩神仙鱼饲料中的叶黄素添加量建议为200~300 mg/kg。

摘要:为揭示不同盐度环境对凡纳滨对虾家系体质量和存活性状的影响，本研究标记来自72个家系的4348尾对虾，在盐度30（HS组）和盐度15（LS组）条件下混养60 d，分析体质量和存活性状的遗传参数以及基因型与环境互作效应。结果显示，HS组的凡纳滨对虾平均体质量和存活率均高于LS组。估算体质量、存活性状遗传参数，结果显示HS和LS组体质量的遗传力估计值分别为0.51±0.08和0.30±0.07，属高遗传力；转换后存活性状遗传力估计值分别为0.22和0.39，也表现为中高遗传力水平。综合HS和LS组的数据，估算的体质量和转换后存活性状遗传力分别为0.45±0.07和0.31，均表现为高遗传力水平。然而由于收敛原因，在估计模型中未能包括共同环境效应，上述遗传参数估计值偏高。估算基因型与环境互作效应（G×E），结果显示两个盐度间体质量和存活性状均表现为高度遗传相关（0.81~0.90），G×E方差组分与加性遗传方差组分比值均小于0.5，G×E效应均不显著。研究表明，尽管凡纳滨对虾的生长和存活性状在两个盐度下存在一定差异，然而基因型与盐度的互作效应并不显著，由此认为在盐度15~30的范围内，不需要针对不同的盐度建立不同的选育系。

摘要:为深入了解栉孔扇贝形态性状与湿重之间的关系，为栉孔扇贝选育工作中亲贝的挑选提供策略，本研究使用来自同一家系的栉孔扇贝子代324只一龄个体以及生长到二龄的230只个体的性状数据进行通径分析。性状数据包括壳长（x₁/cm），壳高（x₂/cm），壳宽（x₃/cm），湿重（y/g）。结果显示，所有形态性状和湿重之间的相关系数均达到极显著水平。其中与一龄贝湿重相关系数最大的是壳长，为0.939，与二龄贝湿重相关系数最大的是壳高，为0.808。通径分析结果显示，壳长对一龄贝湿重的直接影响最大（0.532），壳高对一龄贝湿重的直接影响最小（0.163）。壳高对二龄贝湿重的直接影响最大（0.451），壳长对二龄贝湿重的直接影响最小（0.191），决定系数与以上通径分析结果的变化趋势一致。利用多元回归的方法构建了一龄贝和二龄贝形态性状与湿重间的回归方程，一龄贝：y=-10.527+0.287x₁+0.087x₂+0.409x₃，R²=0.926；二龄贝：y=-68.609+0.254x₁+0.719x₂+2.008x₃，R²=0.830。本研究结果为栉孔扇贝种贝的挑选提供了理论依据。

摘要:为研究冷诱导结合蛋白（CIRP）在大黄鱼低温适应过程中的作用，采用同源克隆技术获得了大黄鱼CIRP基因，并通过实时荧光定量PCR （qRT-PCR）技术检测了低温胁迫下大黄鱼各组织中CIRP基因的表达变化。结果显示，大黄鱼CIRP基因cDNA序列全长1211 bp，推测编码一个由182个氨基酸组成、分子量为19 ku的蛋白。序列比对显示硬骨鱼类CIRP基因序列较为保守，特别是N端的RNA识别基序（RRM）高度保守。系统进化树分析显示大黄鱼CIRP与银鳕相似性最高（81.5%），所有硬骨鱼类聚为一个大支。慢性低温胁迫中（12℃缓降至6℃），皮肤和肌肉中CIRP基因的表达量呈随温度降低而升高的趋势，6℃时表达量分别为12℃时的11.56倍和9.03倍；鳃、脑和心脏中CIRP基因表达量均呈先显著上升后显著下降的趋势，其峰值均出现在8℃时，表达量分别为12℃时的5.07、7.69和2.83倍；肠、肾脏、肝脏和脾脏中的表达量随温度降低而下降，6℃时的表达量最低，与12℃时相比降幅分别为80.0%、65.6%、91.2%、55.6%。急性低温胁迫（由12℃骤降至8℃并胁迫4 h）条件下，鳃、皮肤、脑、肝脏、心脏中CIRP基因表达量均呈先升高后降低的变化，反映了机体对低温胁迫的应激、适应过程；肌肉和肠中的表达量则始终显著低于胁迫前。慢性和急性低温胁迫中各组织CIRP表达量变化的差异提示，大黄鱼机体在低温胁迫响应和适应中有着多种调节机制。研究表明，CIRP基因参与了大黄鱼应对低温胁迫的过程。

摘要:为研究饲料中不同水平的花生四烯酸（arachidonic acid， ARA）对发育前期的大菱鲆亲鱼性类固醇激素合成量及合成过程的影响，配制3种等氮等脂（脂肪含量13%）的实验饲料，分别含有不同梯度水平的花生四烯酸：0.72%（不添加花生四烯酸精制油的对照组，C），5.63%（添加低水平ARA的处理组，ARA-L）及15.03%（添加高水平ARA的处理组，ARA-H）（各数值均为占总脂肪酸的比例）。每组饲料投喂3个实验桶，每桶放25尾3龄大菱鲆亲鱼（雌雄比例约为1：1）。养殖实验在室内流水系统内进行，每天饱食投喂2次，养殖周期为5个月。养殖结束后，分别取性腺发育前期的雌雄鱼测血清雌二醇和睾酮的含量并检测性腺中性类固醇激素合成相关蛋白质的基因表达量。结果显示：与对照组相比，饲料中高水平的花生四烯酸显著降低了雌鱼血清中雌二醇的含量，而雄鱼血清中睾酮的含量在低水平花生四烯酸处理组显著降低。在卵巢中，饲料中高水平的花生四烯酸显著降低了促卵泡激素受体mRNA的表达量，但是饲料中低水平的花生四烯酸显著提高了17α羟化酶的mRNA表达量。在精巢中，饲料中低水平的花生四烯酸显著降低了固醇合成急性调节蛋白以及17α羟化酶的mRNA表达量，但显著升高了芳香化酶的mRNA表达量。饲料中花生四烯酸提高了性腺、肝脏和肌肉组织中花生四烯酸的含量，但降低了二十碳五烯酸（EPA）的含量，卵巢中的花生四烯酸累积量高于精巢。综上所述，饲料中添加一定量的花生四烯酸抑制了发育前期大菱鲆亲鱼雌二醇和睾酮的合成，在卵巢中，这种抑制作用可能是通过抑制促卵泡激素受体的表达来实现，而在精巢中，可能是通过抑制固醇合成急性调节蛋白以及17α羟化酶来实现。

摘要:为探索启动子在热休克蛋白90表达调控中的作用，本研究在课题组已有杂色鲍HSP90基因cDNA的基础上，通过Genome walking、Tail-PCR和常规PCR等技术克隆获得该基因的5'调控区序列。在翻译起始位点（ATG）和第一外显子（长度94 bp）之间有一个809 bp的内含子，第一外显子之前的5'调控区共2800 bp，从预测的转录起始位点（A）起，共2811 bp。在转录起始位点（A）上游-30 bp处存在TATA box。潜在的转录因子结合位点包括ATF、TBP、Sp1、Oct-1、C/EBPalpha、NF-1、NF-κappaB、GATA-1、Sox-2等。CpG岛预测软件分析其含1个CpG岛，长度为131 bp。实验构建了8个启动子缺失片段的萤火虫荧光素酶表达载体，通过瞬时转染293T细胞并进行双荧光素酶报告基因活性检测，确定杂色鲍HSP90基因核心启动子区位于-98~83 bp。在-624~-539 bp，Oct-1、C/EBPalpha、NF-1这3个转录因子都起到一定的抑制作用。

摘要:LC3B是检测自噬程度的标志性分子，但是在低等动物体内缺少特异性强的LC3B抗体。为研究贝类的自噬性细胞死亡，本研究通过将紫贻贝的LC3B编码序列克隆到pET-32a原核表达载体中构建重组表达载体，进而对IPTG诱导浓度、诱导表达时间进行摸索；采用亲和层析对重组蛋白进行纯化，并采用SDS-PAGE检测及Western blot进行验证；利用获得的重组蛋白免疫新西兰兔，制备其多克隆抗体。结果显示，在20℃，转速为150 r/min条件下，当IPTG浓度为0.6 mmol/L，诱导表达10 h后，可以得到高表达量、可溶性的重组MgLC3B-His融合蛋白，亲和层析纯化后，获得单一条带的MgLC3B-His可溶性重组蛋白；采用纯化后的MgLC3B-His融合蛋白对新西兰兔进行多次免疫，采集分离兔抗血清并利用protein A纯化，获得紫贻贝的LC3B多克隆抗体，效价为25 600。紫贻贝LC3B多克隆抗体的成功制备，为今后深入开展紫贻贝及相近物种的细胞自噬研究奠定了基础。