2014年第38卷第7期文章目次
2014, 38(7):913-919.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49152
摘要:
为探讨KK-42提高感染嗜水气单孢菌的日本沼虾幼虾成活率的机制，实验首次克隆了α2M部分序列，研究了α2M基因的时空表达以及KK-42对其表达和活力的影响。将体长3.5～5.0 cm的日本沼虾幼虾随机分为2组，分别用1.95×10-4 mol/L的KK-42溶液和不含KK-42的溶液浸泡处理1 min，12 h后，每组再分为2个亚组，分别向虾腹部注射嗜水气单胞菌菌悬液（菌攻毒实验组和菌攻毒对照组）或生理盐水（实验组-1和对照组-1），于不同时间点测定幼虾的成活率、α2M基因表达水平和活力的变化。结果显示，KK-42预处理可显著提高感染嗜水气单胞菌的日本沼虾幼虾成活率。经BLAST比对，克隆的α2M部分mRNA序列与罗氏沼虾α2M具有90%以上同源性。实时荧光定量PCR实验显示，α2M基因表达水平在血细胞中最高，且以蜕皮前期最为显著。KK-42处理的幼虾血细胞α2M基因的表达无显著性差异；嗜水气单胞菌刺激使血细胞α2M mRNA水平在3 h比0 h提高了580%，其活力在24 h增幅为47.5%；而菌攻毒实验组mRNA水平在6～48 h明显高于菌攻毒对照组，尤其在12 h，增幅为511%，其活力水平也呈同样的变化趋势。研究表明，KK-42预处理能上调感染嗜水气单胞菌的幼虾血细胞α2M基因的转录水平，诱导α2M活力增强，这可能增强了幼虾的免疫水平，从而提高成活率。
为探讨KK-42提高感染嗜水气单孢菌的日本沼虾幼虾成活率的机制，实验首次克隆了α2M部分序列，研究了α2M基因的时空表达以及KK-42对其表达和活力的影响。将体长3.5～5.0 cm的日本沼虾幼虾随机分为2组，分别用1.95×10-4 mol/L的KK-42溶液和不含KK-42的溶液浸泡处理1 min，12 h后，每组再分为2个亚组，分别向虾腹部注射嗜水气单胞菌菌悬液（菌攻毒实验组和菌攻毒对照组）或生理盐水（实验组-1和对照组-1），于不同时间点测定幼虾的成活率、α2M基因表达水平和活力的变化。结果显示，KK-42预处理可显著提高感染嗜水气单胞菌的日本沼虾幼虾成活率。经BLAST比对，克隆的α2M部分mRNA序列与罗氏沼虾α2M具有90%以上同源性。实时荧光定量PCR实验显示，α2M基因表达水平在血细胞中最高，且以蜕皮前期最为显著。KK-42处理的幼虾血细胞α2M基因的表达无显著性差异；嗜水气单胞菌刺激使血细胞α2M mRNA水平在3 h比0 h提高了580%，其活力在24 h增幅为47.5%；而菌攻毒实验组mRNA水平在6～48 h明显高于菌攻毒对照组，尤其在12 h，增幅为511%，其活力水平也呈同样的变化趋势。研究表明，KK-42预处理能上调感染嗜水气单胞菌的幼虾血细胞α2M基因的转录水平，诱导α2M活力增强，这可能增强了幼虾的免疫水平，从而提高成活率。
2014, 38(7):920-928.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49008
摘要:
为探讨小球藻中碳酸酐酶对环境调控的响应规律，提高小球藻的生物量及对无机碳的利用，实验采用生化和荧光定量PCR方法研究了盐度和2种无机碳对蛋白核小球藻生长、胞外碳酸酐酶（CA）活性及3种亚型碳酸酐酶基因（ca）表达的影响。结果发现，培养至第9天时盐度15和30培养藻生长较快，盐度45藻细胞密度降为盐度15的0.83倍；CA活性随着盐度增加而降低，盐度45长时间处理酶活性降低更为明显，3种亚型ca基因表达量则随盐度升高而增加。2倍空气CO2浓度培养藻密度可达空气CO2浓度的1.23倍，但CA活性较低，第8天为空气CO2浓度组的0.41倍，α-ca和γ-ca基因表达量比空气CO2浓度组略有升高。在0～10 mmol/L HCO3-条件下，蛋白核小球藻随HCO3-含量升高生长加快，CA活性在5 mmol/L HCO3-最高，而3种亚型ca基因表达量在1 mmol/L HCO3-处理组最高。研究表明，蛋白核小球藻生长比较适合中低盐度、2倍空气CO2浓度和高HCO3-处理，其CA活性可被低盐、空气CO2浓度和5 mmol/L HCO3-所诱导，而ca基因表达在高盐、2倍空气CO2浓度和低HCO3-条件下较高。
为探讨小球藻中碳酸酐酶对环境调控的响应规律，提高小球藻的生物量及对无机碳的利用，实验采用生化和荧光定量PCR方法研究了盐度和2种无机碳对蛋白核小球藻生长、胞外碳酸酐酶（CA）活性及3种亚型碳酸酐酶基因（ca）表达的影响。结果发现，培养至第9天时盐度15和30培养藻生长较快，盐度45藻细胞密度降为盐度15的0.83倍；CA活性随着盐度增加而降低，盐度45长时间处理酶活性降低更为明显，3种亚型ca基因表达量则随盐度升高而增加。2倍空气CO2浓度培养藻密度可达空气CO2浓度的1.23倍，但CA活性较低，第8天为空气CO2浓度组的0.41倍，α-ca和γ-ca基因表达量比空气CO2浓度组略有升高。在0～10 mmol/L HCO3-条件下，蛋白核小球藻随HCO3-含量升高生长加快，CA活性在5 mmol/L HCO3-最高，而3种亚型ca基因表达量在1 mmol/L HCO3-处理组最高。研究表明，蛋白核小球藻生长比较适合中低盐度、2倍空气CO2浓度和高HCO3-处理，其CA活性可被低盐、空气CO2浓度和5 mmol/L HCO3-所诱导，而ca基因表达在高盐、2倍空气CO2浓度和低HCO3-条件下较高。
2014, 38(7):929-938.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49136
摘要:
为获取全人工繁殖中华鲟后代的光照偏好及其可能适应人工环境的遗传行为改变，通过黑白底质颜色选择、趋光性和最适光照选择实验，并采用个体与群体实验相结合的方式对5月龄、7月龄中华鲟子二代幼鱼光照偏好进行了研究。黑白底质实验结果表明，5月龄和7月龄幼鱼偏好白色底质。趋光性个体实验结果表明，5月龄对光亮区（200～250 lx）的选择较为显著（P<0.05），7月龄对过渡区（20～50 lx）选择较为显著（P<0.05）；群体实验结果表明，5月龄和7月龄幼鱼均对过渡区（20～50 lx）的选择较为显著（P<0.05），此现象可能与“信号-适应”假说和最适光照范围有关。最适光照实验结果表明，5月龄幼鱼对45～135 lx照度区选择显著高于其他区域（P<0.05）；7月龄幼鱼较多地选择23～202 lx照度区，表明随着年龄增大，中华鲟子二代幼鱼对光照的可接受范围变大。研究表明，中华鲟子二代5月龄和7月龄幼鱼偏好白色底质，最适照度为20～200 lx。实验结果可以为中华鲟子二代人工养殖和放流提供参考。
为获取全人工繁殖中华鲟后代的光照偏好及其可能适应人工环境的遗传行为改变，通过黑白底质颜色选择、趋光性和最适光照选择实验，并采用个体与群体实验相结合的方式对5月龄、7月龄中华鲟子二代幼鱼光照偏好进行了研究。黑白底质实验结果表明，5月龄和7月龄幼鱼偏好白色底质。趋光性个体实验结果表明，5月龄对光亮区（200～250 lx）的选择较为显著（P<0.05），7月龄对过渡区（20～50 lx）选择较为显著（P<0.05）；群体实验结果表明，5月龄和7月龄幼鱼均对过渡区（20～50 lx）的选择较为显著（P<0.05），此现象可能与“信号-适应”假说和最适光照范围有关。最适光照实验结果表明，5月龄幼鱼对45～135 lx照度区选择显著高于其他区域（P<0.05）；7月龄幼鱼较多地选择23～202 lx照度区，表明随着年龄增大，中华鲟子二代幼鱼对光照的可接受范围变大。研究表明，中华鲟子二代5月龄和7月龄幼鱼偏好白色底质，最适照度为20～200 lx。实验结果可以为中华鲟子二代人工养殖和放流提供参考。
2014, 38(7):939-945.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49130
摘要:
为确证长江刀鲚生殖洄游季节的短颌刀鲚是否为江海洄游个体，采用X射线电子探针微区分析技术（EPMA）研究了2013年4月27日采自长江靖江段的1尾短颌鲚（XGC-A）和1尾长颌鲚（XGC-B）矢耳石的锶（Sr）和钙（Ca）的微化学特征，同时将实验结果与确认是江海洄游型长江刀鲚矢耳石的Sr和Ca的微化学特征进行了比对分析。定量线分析结果显示，短颌鲚和长颌鲚个体的Sr/Ca值均波动显著，不仅具有对应淡水生活的低值（1.59±0.80、1.55±0.74），而且出现了对应于海水生活的高值（4.38±1.33、3.56±0.94），显示出其溯河洄游的履历；耳石元素面分布分析结果同时验证了短颌鲚和长颌鲚均参与江海洄游的事实。研究表明，目前长江中存在参与江海洄游的短颌鲚个体。
为确证长江刀鲚生殖洄游季节的短颌刀鲚是否为江海洄游个体，采用X射线电子探针微区分析技术（EPMA）研究了2013年4月27日采自长江靖江段的1尾短颌鲚（XGC-A）和1尾长颌鲚（XGC-B）矢耳石的锶（Sr）和钙（Ca）的微化学特征，同时将实验结果与确认是江海洄游型长江刀鲚矢耳石的Sr和Ca的微化学特征进行了比对分析。定量线分析结果显示，短颌鲚和长颌鲚个体的Sr/Ca值均波动显著，不仅具有对应淡水生活的低值（1.59±0.80、1.55±0.74），而且出现了对应于海水生活的高值（4.38±1.33、3.56±0.94），显示出其溯河洄游的履历；耳石元素面分布分析结果同时验证了短颌鲚和长颌鲚均参与江海洄游的事实。研究表明，目前长江中存在参与江海洄游的短颌鲚个体。
2014, 38(7):946-955.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49079
摘要:
为了丰富拟目乌贼人工繁育理论，采用组织学方法，对其雌雄生殖系统的结构进行了研究。结果显示，雄性生殖系统可分为精巢、输精管、黏液腺、放射导管腺、中被膜腺、外被膜腺、硬腺、终腺和精荚囊9部分，其中输精管可分为前段、中段（壶腹）和后段3部分。精子发生不同步，成熟精子自精巢产生后，通过输精管，在黏液腺和放射导管腺中形成精团，在中被膜腺和外被膜腺中按规律进行重新排列，硬腺的主要作用是吸水使精荚变硬，最后在终腺中成熟，储存于精荚囊中，在生殖季节分批排出。雌性生殖系统可分为卵巢、输卵管、输卵管腺、1对缠卵腺和1对副缠卵腺5部分，可推测卵子发生不同步，分批成熟，在输卵管腺、缠卵腺和副缠卵腺共同作用下形成三级卵膜结构。拟目乌贼雌雄生殖系统的结构与其受精和产卵方式是相适应的。
为了丰富拟目乌贼人工繁育理论，采用组织学方法，对其雌雄生殖系统的结构进行了研究。结果显示，雄性生殖系统可分为精巢、输精管、黏液腺、放射导管腺、中被膜腺、外被膜腺、硬腺、终腺和精荚囊9部分，其中输精管可分为前段、中段（壶腹）和后段3部分。精子发生不同步，成熟精子自精巢产生后，通过输精管，在黏液腺和放射导管腺中形成精团，在中被膜腺和外被膜腺中按规律进行重新排列，硬腺的主要作用是吸水使精荚变硬，最后在终腺中成熟，储存于精荚囊中，在生殖季节分批排出。雌性生殖系统可分为卵巢、输卵管、输卵管腺、1对缠卵腺和1对副缠卵腺5部分，可推测卵子发生不同步，分批成熟，在输卵管腺、缠卵腺和副缠卵腺共同作用下形成三级卵膜结构。拟目乌贼雌雄生殖系统的结构与其受精和产卵方式是相适应的。
2014, 38(7):956-964.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49121
摘要:
为研究河南华溪蟹消化系统的形态结构及组织学特征，采用石蜡切片、H.E.染色和光镜等技术，对河南华溪蟹成蟹消化系统各组织器官的结构进行了观察。结果显示，河南华溪蟹的消化系统主要由消化道和消化腺组成。消化道主要包括食道、胃、中肠和后肠，消化腺为肝胰腺。胃包括贲门胃和幽门胃：贲门胃内有钙化的几丁质齿、隆嵴、短刺及刚毛等组成的胃磨，可磨碎食物；幽门胃内侧可见特殊形态的梳状结构，可过滤食物。在光学显微镜下，食道、中肠和后肠均由黏膜层、肌层和结缔组织层构成，其各段内表面均有由上皮细胞与基膜内凸形成的多级皱褶和嵴，有由环形、纵形和辐射状排列的肌层。仅中肠表面有典型微绒毛结构，无角质膜。食道与后肠上皮表面均有较发达的纤毛层。肝胰腺主要由基膜和4种上皮细胞构成，即吸收细胞（R细胞）、泡状细胞（B细胞）、纤维细胞（F细胞）和胚细胞（E细胞）。
为研究河南华溪蟹消化系统的形态结构及组织学特征，采用石蜡切片、H.E.染色和光镜等技术，对河南华溪蟹成蟹消化系统各组织器官的结构进行了观察。结果显示，河南华溪蟹的消化系统主要由消化道和消化腺组成。消化道主要包括食道、胃、中肠和后肠，消化腺为肝胰腺。胃包括贲门胃和幽门胃：贲门胃内有钙化的几丁质齿、隆嵴、短刺及刚毛等组成的胃磨，可磨碎食物；幽门胃内侧可见特殊形态的梳状结构，可过滤食物。在光学显微镜下，食道、中肠和后肠均由黏膜层、肌层和结缔组织层构成，其各段内表面均有由上皮细胞与基膜内凸形成的多级皱褶和嵴，有由环形、纵形和辐射状排列的肌层。仅中肠表面有典型微绒毛结构，无角质膜。食道与后肠上皮表面均有较发达的纤毛层。肝胰腺主要由基膜和4种上皮细胞构成，即吸收细胞（R细胞）、泡状细胞（B细胞）、纤维细胞（F细胞）和胚细胞（E细胞）。
2014, 38(7):965-972.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49080
摘要:
为了进一步了解重金属Pb对贝类的毒性毒理影响，研究了4个暴毒浓度（5、15、45和90 μg/L）Pb2+对泥蚶鳃和肝脏组织显微结构的影响，及其中2个高浓度组Pb2+暴毒对泥蚶鳃和肝脏组织超微结构的影响，处理时间为96 h。结果显示，低浓度组Pb2+造成泥蚶鳃丝脱离其相连的软骨组织；高浓度组Pb2+使其鳃丝呼吸上皮细胞出现脱落，鳃腔肿胀、内有血细胞堆积，鳃丝断裂；超微结构分析发现，随着浓度的升高，鳃上皮细胞中次级溶酶体和线粒体数量均增加。Pb对泥蚶肝脏组织的显微结构影响仅见高浓度组肝小管附近有黄色物质沉积，消化管界限缺失，超微结构表明随着浓度的升高，肝细胞内沉积大量的黑色嗜锇性物质，次级溶酶体亦大量增加，细胞胞质及细胞核出现空泡，最后将导致细胞坏死，造成肝细胞永久性损伤。结合其他重金属毒性研究可发现，重金属引起的病理学变化并不具有金属特异性，主要还是氧化胁迫造成的氧化损伤。研究推测，生物体的抗氧化体系在重金属解毒中发挥了重要作用。
为了进一步了解重金属Pb对贝类的毒性毒理影响，研究了4个暴毒浓度（5、15、45和90 μg/L）Pb2+对泥蚶鳃和肝脏组织显微结构的影响，及其中2个高浓度组Pb2+暴毒对泥蚶鳃和肝脏组织超微结构的影响，处理时间为96 h。结果显示，低浓度组Pb2+造成泥蚶鳃丝脱离其相连的软骨组织；高浓度组Pb2+使其鳃丝呼吸上皮细胞出现脱落，鳃腔肿胀、内有血细胞堆积，鳃丝断裂；超微结构分析发现，随着浓度的升高，鳃上皮细胞中次级溶酶体和线粒体数量均增加。Pb对泥蚶肝脏组织的显微结构影响仅见高浓度组肝小管附近有黄色物质沉积，消化管界限缺失，超微结构表明随着浓度的升高，肝细胞内沉积大量的黑色嗜锇性物质，次级溶酶体亦大量增加，细胞胞质及细胞核出现空泡，最后将导致细胞坏死，造成肝细胞永久性损伤。结合其他重金属毒性研究可发现，重金属引起的病理学变化并不具有金属特异性，主要还是氧化胁迫造成的氧化损伤。研究推测，生物体的抗氧化体系在重金属解毒中发挥了重要作用。
2014, 38(7):973-980.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48941
摘要:
为了确定大黄鱼运输的适宜条件，实验选取平均体质量为（0.12±0.03）g 的大黄鱼幼鱼为实验对象，采取析因设计，设3个运输密度（2、4 和 8 g/L）和5个运输盐度（5、10、15、20和25），共计15个处理组研究了不同密度和盐度运输条件下，大黄鱼幼鱼皮质醇、糖元及乳酸含量的变化。经过水温16.5℃、10 h的运输，统计各组的死亡率，测定各组水中总氨氮含量。结果显示，在运输结束后，4和8 g/L 密度组死亡率（1.33%、2.63%）显著高于2 g/L密度组（0.77%），盐度25组死亡率（0.44%）显著低于盐度10、15组（1.94%、1.67%），盐度10、15组死亡率显著低于盐度5组（2.72%），各组水中总氨氮含量较运输前（0.15 mg/L）均显著升高，各密度组水中总氨氮含量均有显著性差异，高密度组总氨氮含量高于低密度组，8 g/L密度条件下盐度5组水中总氨氮含量（1.63 mg/L）显著高于盐度15（1.38 mg/L）、盐度20（1.34 mg/L）和盐度25（1.31 mg/L）组，4 g/L密度条件下盐度5组水中总氨氮含量（1.31 mg/L）显著高于其他各盐度组，2 g/L密度条件下盐度5组水中总氨氮含量（0.83 mg/L）显著高于盐度25组（0.49 mg/L）；运输胁迫导致各组皮质醇含量均较运输前（6 476.35 ng/L）显著升高，各组间皮质醇含量无显著性差异；各组糖元含量均较运输前（4.37 mg/g prot）显著降低，运输后各组间糖元含量无显著性差异；各组乳酸含量均较运输前（0.57 mmol/g prot）显著升高，运输后各密度组间乳酸含量无显著性差异，3个密度下盐度5组乳酸含量（1.91、2.02、1.76 mmol/g prot）均显著高于盐度20（1.55、1.21、1.69 mmol/g prot）和盐度25组（1.36、1.44、1.26 mmol/g prot），盐度10组乳酸含量（1.77、1.83、1.60 mmol/g prot）显著高于盐度25组（1.36、1.44、1.26 mmol/g prot）。研究表明，较高的运输密度和较低的盐度会加重大黄鱼的应激性反应，在本实验条件下，规格为 0.1 g左右的大黄鱼幼鱼，其运输密度不宜超过8 g/L，盐度不宜低于5。
为了确定大黄鱼运输的适宜条件，实验选取平均体质量为（0.12±0.03）g 的大黄鱼幼鱼为实验对象，采取析因设计，设3个运输密度（2、4 和 8 g/L）和5个运输盐度（5、10、15、20和25），共计15个处理组研究了不同密度和盐度运输条件下，大黄鱼幼鱼皮质醇、糖元及乳酸含量的变化。经过水温16.5℃、10 h的运输，统计各组的死亡率，测定各组水中总氨氮含量。结果显示，在运输结束后，4和8 g/L 密度组死亡率（1.33%、2.63%）显著高于2 g/L密度组（0.77%），盐度25组死亡率（0.44%）显著低于盐度10、15组（1.94%、1.67%），盐度10、15组死亡率显著低于盐度5组（2.72%），各组水中总氨氮含量较运输前（0.15 mg/L）均显著升高，各密度组水中总氨氮含量均有显著性差异，高密度组总氨氮含量高于低密度组，8 g/L密度条件下盐度5组水中总氨氮含量（1.63 mg/L）显著高于盐度15（1.38 mg/L）、盐度20（1.34 mg/L）和盐度25（1.31 mg/L）组，4 g/L密度条件下盐度5组水中总氨氮含量（1.31 mg/L）显著高于其他各盐度组，2 g/L密度条件下盐度5组水中总氨氮含量（0.83 mg/L）显著高于盐度25组（0.49 mg/L）；运输胁迫导致各组皮质醇含量均较运输前（6 476.35 ng/L）显著升高，各组间皮质醇含量无显著性差异；各组糖元含量均较运输前（4.37 mg/g prot）显著降低，运输后各组间糖元含量无显著性差异；各组乳酸含量均较运输前（0.57 mmol/g prot）显著升高，运输后各密度组间乳酸含量无显著性差异，3个密度下盐度5组乳酸含量（1.91、2.02、1.76 mmol/g prot）均显著高于盐度20（1.55、1.21、1.69 mmol/g prot）和盐度25组（1.36、1.44、1.26 mmol/g prot），盐度10组乳酸含量（1.77、1.83、1.60 mmol/g prot）显著高于盐度25组（1.36、1.44、1.26 mmol/g prot）。研究表明，较高的运输密度和较低的盐度会加重大黄鱼的应激性反应，在本实验条件下，规格为 0.1 g左右的大黄鱼幼鱼，其运输密度不宜超过8 g/L，盐度不宜低于5。
2014, 38(7):981-991.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49085
摘要:
为了解不同水温环境中（5～25℃）多棘海盘车（4～8 cm）对菲律宾蛤仔（20～40 mm）的摄食选择性，本实验利用饵料收益率、摄食规格选择性、摄食量与摄食率等指数，分析了温度、多棘海盘车规格及饵料规格对多棘海盘车摄食选择性的影响。结果显示，实验条件下，捕食者及被捕食者规格对饵料收益率影响显著，温度对饵料收益率影响不显著；根据饵料收益模型，4种规格多棘海盘车依次在摄食20、23、30和35 mm蛤仔时的饵料收益率最大，收益率分别为0.62、0.70、0.83、0.94 mg/min；5~15℃条件下，摄食量随水温升高而增大，15℃为多棘海盘车摄食蛤仔的最适水温，此时5~8 cm多棘海盘车摄食量均达最大值，分别为0.37、0.45和0.54 g/d，之后随水温升高摄食量减小；摄食率昼夜差异显著，夜间显著高于白天；青岛近海5-6月的水温（13~18℃）为蛤仔春季繁殖的适宜水温，也是多棘海盘车最适生长和摄食温度，此时应加强对多棘海盘车的防治和清除。
为了解不同水温环境中（5～25℃）多棘海盘车（4～8 cm）对菲律宾蛤仔（20～40 mm）的摄食选择性，本实验利用饵料收益率、摄食规格选择性、摄食量与摄食率等指数，分析了温度、多棘海盘车规格及饵料规格对多棘海盘车摄食选择性的影响。结果显示，实验条件下，捕食者及被捕食者规格对饵料收益率影响显著，温度对饵料收益率影响不显著；根据饵料收益模型，4种规格多棘海盘车依次在摄食20、23、30和35 mm蛤仔时的饵料收益率最大，收益率分别为0.62、0.70、0.83、0.94 mg/min；5~15℃条件下，摄食量随水温升高而增大，15℃为多棘海盘车摄食蛤仔的最适水温，此时5~8 cm多棘海盘车摄食量均达最大值，分别为0.37、0.45和0.54 g/d，之后随水温升高摄食量减小；摄食率昼夜差异显著，夜间显著高于白天；青岛近海5-6月的水温（13~18℃）为蛤仔春季繁殖的适宜水温，也是多棘海盘车最适生长和摄食温度，此时应加强对多棘海盘车的防治和清除。
2014, 38(7):992-998.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49127
摘要:
为了解刺参摄食的生理生态学特性，本实验在室内模拟研究了不同体质量刺参[A（4.77±0.95）g、B（15.12±1.14）g、C（34.77±7.95）g、D（78.13±4.99）g]的有机物摄食率、吸收效率分别对饵料质量[Ⅰ（100%海泥）、Ⅱ（88%海泥+12%海带粉）、Ⅲ（76%海泥+24%海带粉）、Ⅳ（64%海泥+36%海带粉）]及温度[（5.1±0.4）、（10.9±0.7）、（12.5±0.6）、（14.2±0.7）和（16.1±0.6）℃]变化的响应。结果表明，摄食率（OIR）与饵料质量（OC）回归方程为OIR=a×OC/（OC+b），其中a、b分别为最大摄食率与半饱和常数；双因素方差分析结果显示，饵料质量、体质量对刺参摄食影响极显著，而二者交互作用对其影响不显著。与温度（T）的关系为OIR=c×T2+d×T+e，c=-（0.007 5～0.016 4）、d=0.298～0.769、e=-（0.742～1.977）；水温、体质量对刺参摄食均有显著影响；而其交互作用对摄食率的影响极显著，对吸收效率则不显著。饵料质量、温度和初始体质量（WW）组合双因子与摄食率的关系分别为OIR=12.55×WW-0.361+7.92×OC/（OC+4.373）-4.70，OIR=2.2×WW-0.384+0.033×WW-0.384 ×T2+0.077×T。协方差分析表明，其相关系数呈极显著水平。本研究量化了刺参摄食率与饵料质量、水温、体质量之间的相关关系，并初步掌握了有机物摄食率的变化规律。
为了解刺参摄食的生理生态学特性，本实验在室内模拟研究了不同体质量刺参[A（4.77±0.95）g、B（15.12±1.14）g、C（34.77±7.95）g、D（78.13±4.99）g]的有机物摄食率、吸收效率分别对饵料质量[Ⅰ（100%海泥）、Ⅱ（88%海泥+12%海带粉）、Ⅲ（76%海泥+24%海带粉）、Ⅳ（64%海泥+36%海带粉）]及温度[（5.1±0.4）、（10.9±0.7）、（12.5±0.6）、（14.2±0.7）和（16.1±0.6）℃]变化的响应。结果表明，摄食率（OIR）与饵料质量（OC）回归方程为OIR=a×OC/（OC+b），其中a、b分别为最大摄食率与半饱和常数；双因素方差分析结果显示，饵料质量、体质量对刺参摄食影响极显著，而二者交互作用对其影响不显著。与温度（T）的关系为OIR=c×T2+d×T+e，c=-（0.007 5～0.016 4）、d=0.298～0.769、e=-（0.742～1.977）；水温、体质量对刺参摄食均有显著影响；而其交互作用对摄食率的影响极显著，对吸收效率则不显著。饵料质量、温度和初始体质量（WW）组合双因子与摄食率的关系分别为OIR=12.55×WW-0.361+7.92×OC/（OC+4.373）-4.70，OIR=2.2×WW-0.384+0.033×WW-0.384 ×T2+0.077×T。协方差分析表明，其相关系数呈极显著水平。本研究量化了刺参摄食率与饵料质量、水温、体质量之间的相关关系，并初步掌握了有机物摄食率的变化规律。
2014, 38(7):999-1008.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49153
摘要:
为评价皂角苷增强鱼类非特异免疫效果，分别用浓度为0、15和35 mg/L的皂角苷浸泡大菱鲆，分析了浸泡后6、12、24、48和72 h时大菱鲆白细胞的吞噬活力、血清补体旁路途径溶血活性、血清与黏液中溶菌酶活性、抑菌活性与碱性磷酸酶（AKP）活性及血清总蛋白浓度。结果显示，皂角苷低浓度组（15 mg/L）与高浓度组（35 mg/L）大菱鲆白细胞吞噬活力分别在浸泡后12与24 h出现显著的增高（P<0.05）。实验组大菱鲆血清中补体旁路途径溶血活性除低浓度组在12与24 h较对照组低外，其他检测时段均高于对照组（P<0.05）。血清溶菌酶活性最高值出现在低浓度组浸泡后6 h时，黏液中未能检测出。不同时间点各组大菱鲆黏液抑菌活力变化幅度较大，两实验组黏液抑菌活力在浸泡后6与12 h时较对照组提高，两个实验组间无差异（P>0.05）。血清中AKP活力高峰值出现在浸泡后6与12 h，该时段AKP的活力显著高于对照组，且实验组间存在差异（P<0.05），而黏液中AKP高峰值出现在12 h，该时段AKP的活力显著高于对照组（P<0.05），实验组间无差异。浸泡皂角苷后6 h高浓度组血清中蛋白浓度达到最高值，除12 h时各组差异不显著外（P>0.05），24～72 h高浓度组中血清蛋白含量均高于低浓度及对照组（P<0.05）。研究表明，皂角苷具有提高鱼类非特异免疫水平的效果。
为评价皂角苷增强鱼类非特异免疫效果，分别用浓度为0、15和35 mg/L的皂角苷浸泡大菱鲆，分析了浸泡后6、12、24、48和72 h时大菱鲆白细胞的吞噬活力、血清补体旁路途径溶血活性、血清与黏液中溶菌酶活性、抑菌活性与碱性磷酸酶（AKP）活性及血清总蛋白浓度。结果显示，皂角苷低浓度组（15 mg/L）与高浓度组（35 mg/L）大菱鲆白细胞吞噬活力分别在浸泡后12与24 h出现显著的增高（P<0.05）。实验组大菱鲆血清中补体旁路途径溶血活性除低浓度组在12与24 h较对照组低外，其他检测时段均高于对照组（P<0.05）。血清溶菌酶活性最高值出现在低浓度组浸泡后6 h时，黏液中未能检测出。不同时间点各组大菱鲆黏液抑菌活力变化幅度较大，两实验组黏液抑菌活力在浸泡后6与12 h时较对照组提高，两个实验组间无差异（P>0.05）。血清中AKP活力高峰值出现在浸泡后6与12 h，该时段AKP的活力显著高于对照组，且实验组间存在差异（P<0.05），而黏液中AKP高峰值出现在12 h，该时段AKP的活力显著高于对照组（P<0.05），实验组间无差异。浸泡皂角苷后6 h高浓度组血清中蛋白浓度达到最高值，除12 h时各组差异不显著外（P>0.05），24～72 h高浓度组中血清蛋白含量均高于低浓度及对照组（P<0.05）。研究表明，皂角苷具有提高鱼类非特异免疫水平的效果。
2014, 38(7):1009-1017.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49031
摘要:
为了分析养殖刀鲚体内与生长环境菌群结构，利用PCR-DGGE技术，对养殖刀鲚鳃、胃、肠壁及肠内容物和养殖水体菌群结构进行了初步分析。PCR-DGGE指纹图谱分离显示，42条清晰条带，其中养殖水体（27）、鳃（9）、胃（13）、肠道壁（19）、肠道内容物（18）的香农指数分别为3.037、1.883、2.193、2.825、2.683；养殖水体与刀鲚鳃、胃、肠道壁及肠道内容物分别具有6、9、11、8共有带。UPGMA聚类分析显示，样品3个重复相似度都在95%以上，差异不明显；不同样品之间，养殖刀鲚鳃和胃聚为一支，具有较高的相似度（76%），同时与养殖水体相似度达29%；养殖刀鲚肠道壁和肠道内容物聚为一支，相似度为38%。 回收测定所有显示条带，主要包含变形菌、放线菌、拟杆菌、柔膜菌、蓝藻细菌、厚壁菌、梭杆菌及少量未定义菌种。 研究表明，PCR-DGGE 技术能区分养殖刀鲚主要部位及水体微生物的结构差异和多样性，澄清养殖刀鲚及生长水体微生物区系，可为定植益生菌的开发提供参考。
为了分析养殖刀鲚体内与生长环境菌群结构，利用PCR-DGGE技术，对养殖刀鲚鳃、胃、肠壁及肠内容物和养殖水体菌群结构进行了初步分析。PCR-DGGE指纹图谱分离显示，42条清晰条带，其中养殖水体（27）、鳃（9）、胃（13）、肠道壁（19）、肠道内容物（18）的香农指数分别为3.037、1.883、2.193、2.825、2.683；养殖水体与刀鲚鳃、胃、肠道壁及肠道内容物分别具有6、9、11、8共有带。UPGMA聚类分析显示，样品3个重复相似度都在95%以上，差异不明显；不同样品之间，养殖刀鲚鳃和胃聚为一支，具有较高的相似度（76%），同时与养殖水体相似度达29%；养殖刀鲚肠道壁和肠道内容物聚为一支，相似度为38%。 回收测定所有显示条带，主要包含变形菌、放线菌、拟杆菌、柔膜菌、蓝藻细菌、厚壁菌、梭杆菌及少量未定义菌种。 研究表明，PCR-DGGE 技术能区分养殖刀鲚主要部位及水体微生物的结构差异和多样性，澄清养殖刀鲚及生长水体微生物区系，可为定植益生菌的开发提供参考。
2014, 38(7):1018-1025.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49137
摘要:
为了解养殖龟鳖源气单胞菌的耐药情况及质粒介导的喹诺酮类耐药（PMQR）、喹诺酮类耐药决定区（QRDR）与耐药表型之间的关系；实验采用K-B纸片法测定了1996-2013年从广东地区患病龟鳖分离的67株气单胞菌对23种常见抗菌药物的耐药性，并检测5种PMQR基因qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac（6'）-Ib-cr，同时分析PMQR基因阳性菌株染色体上gyrA、parC基因QRDR 的突变情况。结果显示，67株气单胞菌对氨苄西林、头孢噻吩和磺胺复合物的耐药率分别高达100%、92.54%和83.58%，对喹诺酮类药物呈现中等耐药，耐药率介于19.40%～64.18%，而对亚胺培南、呋喃妥因、阿米卡星、头孢噻肟敏感性较高，耐药率低于10%；79.10%（53/67）的菌株对3类或以上抗菌药物具有耐药性。19.40%（13/67）的菌株携带PMQR基因，其中，8.96%（6/67）携带qnrS1基因、5.97%（4/67）携带qnrS2基因、7.46%（5/67）携带aac（6'）-Ib-cr基因[其中2株同时携带qnrS2和aac（6'）-Ib-cr基因]。13株PMQR基因阳性菌株均分别携带1～4个质粒，大小介于0.8～15 kb；其中6株在gyrA基因及parC基因上均发生变异，3株仅在gyrA基因上发生变异，另外4株未发现QRDR的基因突变。研究表明，广东地区龟鳖源气单胞菌对多种抗菌药物耐药并存在多重耐药现象；而且PMQR机制的存在预示着喹诺酮类耐药性很可能会在水产临床上更加快速而广泛地传播，应引起重视。
为了解养殖龟鳖源气单胞菌的耐药情况及质粒介导的喹诺酮类耐药（PMQR）、喹诺酮类耐药决定区（QRDR）与耐药表型之间的关系；实验采用K-B纸片法测定了1996-2013年从广东地区患病龟鳖分离的67株气单胞菌对23种常见抗菌药物的耐药性，并检测5种PMQR基因qnrA、qnrB、qnrS、qepA和aac（6'）-Ib-cr，同时分析PMQR基因阳性菌株染色体上gyrA、parC基因QRDR 的突变情况。结果显示，67株气单胞菌对氨苄西林、头孢噻吩和磺胺复合物的耐药率分别高达100%、92.54%和83.58%，对喹诺酮类药物呈现中等耐药，耐药率介于19.40%～64.18%，而对亚胺培南、呋喃妥因、阿米卡星、头孢噻肟敏感性较高，耐药率低于10%；79.10%（53/67）的菌株对3类或以上抗菌药物具有耐药性。19.40%（13/67）的菌株携带PMQR基因，其中，8.96%（6/67）携带qnrS1基因、5.97%（4/67）携带qnrS2基因、7.46%（5/67）携带aac（6'）-Ib-cr基因[其中2株同时携带qnrS2和aac（6'）-Ib-cr基因]。13株PMQR基因阳性菌株均分别携带1～4个质粒，大小介于0.8～15 kb；其中6株在gyrA基因及parC基因上均发生变异，3株仅在gyrA基因上发生变异，另外4株未发现QRDR的基因突变。研究表明，广东地区龟鳖源气单胞菌对多种抗菌药物耐药并存在多重耐药现象；而且PMQR机制的存在预示着喹诺酮类耐药性很可能会在水产临床上更加快速而广泛地传播，应引起重视。
14 萱藻丝状体的种质保存技术
2014, 38(7):1026-1033.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49090
摘要:
采用液体保存法和胶囊化低温保存法对萱藻丝状体进行保存，探讨了液体培养法中温度、光照强度以及胶囊化低温保存法中胶球含水量对萱藻丝状体种质保存的影响。结果显示：（1）在液体保存法中，温度对萱藻丝状体的保存影响较小，当光强为5.4 μmol/（m2·s）时，6～18℃均可实现萱藻丝状体的长期保存；（2）光照强度对萱藻丝状体的液体保存影响显著，16.2 μmol/（m2·s）及以上的光强不利于种质的保存，5.4 μmol/（m2·s）对萱藻丝状体的液体保存最有利；（3）在6～18℃，5.4 μmol/（m2·s）条件下保存萱藻丝状体60 d后，萱藻丝状体细胞状态良好且存活率仍在97%以上；（4）胶球含水量过高或过低均会降低萱藻丝状体胶囊化低温保存后的存活率，15%是萱藻丝状体胶球的最适含水量，在该条件下，萱藻丝状体保存1个月后的存活率仍在50%以上。研究证明，在适宜条件下，液体保存法和胶囊化低温保存法均可实现萱藻丝状体的种质保存。
采用液体保存法和胶囊化低温保存法对萱藻丝状体进行保存，探讨了液体培养法中温度、光照强度以及胶囊化低温保存法中胶球含水量对萱藻丝状体种质保存的影响。结果显示：（1）在液体保存法中，温度对萱藻丝状体的保存影响较小，当光强为5.4 μmol/（m2·s）时，6～18℃均可实现萱藻丝状体的长期保存；（2）光照强度对萱藻丝状体的液体保存影响显著，16.2 μmol/（m2·s）及以上的光强不利于种质的保存，5.4 μmol/（m2·s）对萱藻丝状体的液体保存最有利；（3）在6～18℃，5.4 μmol/（m2·s）条件下保存萱藻丝状体60 d后，萱藻丝状体细胞状态良好且存活率仍在97%以上；（4）胶球含水量过高或过低均会降低萱藻丝状体胶囊化低温保存后的存活率，15%是萱藻丝状体胶球的最适含水量，在该条件下，萱藻丝状体保存1个月后的存活率仍在50%以上。研究证明，在适宜条件下，液体保存法和胶囊化低温保存法均可实现萱藻丝状体的种质保存。
2014, 38(7):1034-1039.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49046
摘要:
采用氟离子选择性电极法对船上不同方式加工处理后南极磷虾不同部位的氟含量进行了分析。结果表明，新鲜南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中的氟含量具有明显差异，其中虾壳中含量最高，为538.67 mg/kg，虾头中含量为395.20 mg/kg，虾肉中含量最少，为50.33 mg/kg，约为虾壳中的十分之一；不同体长的南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中的氟含量差异不显著；总体上环境温度为4℃时，南极磷虾全虾、虾头、虾壳中氟含量随放置时间的延长逐渐下降，但4 h内南极磷虾虾肉中氟含量上升，达到最大值59.67 mg/kg，之后开始下降。经70℃和沸水热处理后的南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中的氟含量差异不显著，热处理后放置1和4 h南极磷虾全虾、虾头、虾壳中氟含量差异不显著，但热处理后虾肉中氟含量高于新鲜虾肉中氟含量。冷冻熟南极磷虾虾肉与冷冻南极磷虾虾肉中氟含量都高于新鲜虾肉中氟含量，但冷冻熟南极磷虾虾肉氟含量比冷冻南极磷虾虾肉低23%。实验结果表明，在船上对南极磷虾进行适当加工处理可以明显减少虾肉中的氟含量。
采用氟离子选择性电极法对船上不同方式加工处理后南极磷虾不同部位的氟含量进行了分析。结果表明，新鲜南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中的氟含量具有明显差异，其中虾壳中含量最高，为538.67 mg/kg，虾头中含量为395.20 mg/kg，虾肉中含量最少，为50.33 mg/kg，约为虾壳中的十分之一；不同体长的南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中的氟含量差异不显著；总体上环境温度为4℃时，南极磷虾全虾、虾头、虾壳中氟含量随放置时间的延长逐渐下降，但4 h内南极磷虾虾肉中氟含量上升，达到最大值59.67 mg/kg，之后开始下降。经70℃和沸水热处理后的南极磷虾全虾、虾头、虾壳、虾肉中的氟含量差异不显著，热处理后放置1和4 h南极磷虾全虾、虾头、虾壳中氟含量差异不显著，但热处理后虾肉中氟含量高于新鲜虾肉中氟含量。冷冻熟南极磷虾虾肉与冷冻南极磷虾虾肉中氟含量都高于新鲜虾肉中氟含量，但冷冻熟南极磷虾虾肉氟含量比冷冻南极磷虾虾肉低23%。实验结果表明，在船上对南极磷虾进行适当加工处理可以明显减少虾肉中的氟含量。
2014, 38(7):1040-1046.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49164
摘要:
为分析水产品源致病菌和腐败菌中群体感应信号分子AHLs的含量和种类，实验建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）同时检测细菌群体感应11种AHLs类信号分子的技术，并与生物报告菌法比较。结果显示，报告菌紫色杆菌CV026和根癌农杆菌A136检测发现嗜水气单胞菌和2株铜绿假单胞菌是AHLs产生菌。建立的LC-MS/MS能完全分离和检测11种AHLs，并发现假单胞菌和嗜水气单胞菌产生的AHLs信号分子含量较高，其中ATCC 9027和ATCC 15692产生3-oxo-C12-HSL，嗜水气单胞菌A2产生C4-HSL，而腐败希瓦氏菌XH4分泌的C4-HSL信号分子含量较低，沙门氏菌ATCC 14028-3、大肠杆菌O157：H7和3种弧菌的AHLs很低。随着细菌浓度的增加，铜绿假单胞菌ATCC 9027产生的AHLs含量逐步增加，在12 h达到最高。研究表明，LC-MS/MS可用于多种AHLs信号分子的定性和定量检测，具有灵敏性与准确性更高的优点。在11株水产品源致病菌和腐败菌中，假单胞菌和气单胞菌分泌的AHLs含量最高。
为分析水产品源致病菌和腐败菌中群体感应信号分子AHLs的含量和种类，实验建立液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）同时检测细菌群体感应11种AHLs类信号分子的技术，并与生物报告菌法比较。结果显示，报告菌紫色杆菌CV026和根癌农杆菌A136检测发现嗜水气单胞菌和2株铜绿假单胞菌是AHLs产生菌。建立的LC-MS/MS能完全分离和检测11种AHLs，并发现假单胞菌和嗜水气单胞菌产生的AHLs信号分子含量较高，其中ATCC 9027和ATCC 15692产生3-oxo-C12-HSL，嗜水气单胞菌A2产生C4-HSL，而腐败希瓦氏菌XH4分泌的C4-HSL信号分子含量较低，沙门氏菌ATCC 14028-3、大肠杆菌O157：H7和3种弧菌的AHLs很低。随着细菌浓度的增加，铜绿假单胞菌ATCC 9027产生的AHLs含量逐步增加，在12 h达到最高。研究表明，LC-MS/MS可用于多种AHLs信号分子的定性和定量检测，具有灵敏性与准确性更高的优点。在11株水产品源致病菌和腐败菌中，假单胞菌和气单胞菌分泌的AHLs含量最高。
2014, 38(7):1047-1055.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49140
摘要:
为防控舟山海域外来物种入侵、保护生态安全及生物资源，2010年及2012年在舟山海域共设置11个潮间带采样点，开展外来物种调查。2010年在舟山海域采集到小藤壶属的疑似外来种，形态分析显示该种壳口呈菱形，有突出关节脊，基底膜质，大颚有4齿，小颚缺刻清晰，触须方圆呈片状，据其形态特征鉴定为东方小藤壶。COⅠ序列的分析结果显示，舟山海域所采集的小藤壶属疑似外来种与东方小藤壶的种群遗传距离为0.994%，系统树分析结果显示该种与东方小藤壶聚为一支系，分支支持率为100%。综合形态和分子2方面的证据，确定该疑似外来种为东方小藤壶，根据文献检索和此海域的历年调查结果分析其为舟山海域的外来物种。2010年在11个样点中，仅有6个样点采集到东方小藤壶，密度在（6±2）～（28±11）个/m2；2012年，东方小藤壶在舟山海域11个样点中均有分布，且密度大幅增长，原有6个样点的密度为（55±8）～（39 533±6 243）个/m2，新出现的5个样点的密度为（16±4）～（20 000±4 000）个/m2。结果显示，舟山海域东方小藤壶目前在新的栖息地中已成功定殖并扩散，成为舟山海域的外来入侵种。
为防控舟山海域外来物种入侵、保护生态安全及生物资源，2010年及2012年在舟山海域共设置11个潮间带采样点，开展外来物种调查。2010年在舟山海域采集到小藤壶属的疑似外来种，形态分析显示该种壳口呈菱形，有突出关节脊，基底膜质，大颚有4齿，小颚缺刻清晰，触须方圆呈片状，据其形态特征鉴定为东方小藤壶。COⅠ序列的分析结果显示，舟山海域所采集的小藤壶属疑似外来种与东方小藤壶的种群遗传距离为0.994%，系统树分析结果显示该种与东方小藤壶聚为一支系，分支支持率为100%。综合形态和分子2方面的证据，确定该疑似外来种为东方小藤壶，根据文献检索和此海域的历年调查结果分析其为舟山海域的外来物种。2010年在11个样点中，仅有6个样点采集到东方小藤壶，密度在（6±2）～（28±11）个/m2；2012年，东方小藤壶在舟山海域11个样点中均有分布，且密度大幅增长，原有6个样点的密度为（55±8）～（39 533±6 243）个/m2，新出现的5个样点的密度为（16±4）～（20 000±4 000）个/m2。结果显示，舟山海域东方小藤壶目前在新的栖息地中已成功定殖并扩散，成为舟山海域的外来入侵种。
