2014年第38卷第3期文章目次
2014, 38(3):400-409.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49000
摘要:
运用组织学方法，对铠平鲉、花斑平鲉、大泷六线鱼和斑头六线鱼的性成熟个体视网膜光感受细胞和最小分辨角进行了比较研究。结果表明：（1）大泷六线鱼和斑头六线鱼视锥细胞的排列方式为4个双锥细胞围绕一个单锥细胞构成正方形或者菱形镶嵌结构，铠平鲉和花斑平鲉的双锥细胞排列成行，单锥细胞随机分布于4个双锥细胞之间；分析认为，大泷六线鱼和斑头六线鱼视锥排列方式更复杂，单锥细胞与双锥细胞的比值（SC/DC）更高，推测其具有更好的色觉。（2）铠平鲉和花斑平鲉视柱细胞与视锥细胞的比值（R/C）大于7：1，而大泷六线鱼和斑头六线鱼的R/C小于3：1；推测铠平鲉和花斑平鲉更适合在夜间活动，而大泷六线鱼和斑头六线鱼属白天活动的鱼类。（3）铠平鲉、花斑平鲉、大泷六线鱼和斑头六线鱼视锥细胞密度最高处分别位于视网膜的腹-颞（V-T）区、腹区（V）、腹-颞（V-T）区和背-颞区（D-T），与各自的生活习性和摄食行为相适应。（4）4种岩礁性鱼类的成熟个体中，铠平鲉的最小分辨角最大，其次为花斑平鲉和大泷六线鱼，斑头六线鱼的最小分辨角最小。分析认为，即使是同样栖息于礁区的鱼类，其视觉特征也存在差异，这或许可以为岩礁区选择性渔具的开发提供一些有益的参考。
运用组织学方法，对铠平鲉、花斑平鲉、大泷六线鱼和斑头六线鱼的性成熟个体视网膜光感受细胞和最小分辨角进行了比较研究。结果表明：（1）大泷六线鱼和斑头六线鱼视锥细胞的排列方式为4个双锥细胞围绕一个单锥细胞构成正方形或者菱形镶嵌结构，铠平鲉和花斑平鲉的双锥细胞排列成行，单锥细胞随机分布于4个双锥细胞之间；分析认为，大泷六线鱼和斑头六线鱼视锥排列方式更复杂，单锥细胞与双锥细胞的比值（SC/DC）更高，推测其具有更好的色觉。（2）铠平鲉和花斑平鲉视柱细胞与视锥细胞的比值（R/C）大于7：1，而大泷六线鱼和斑头六线鱼的R/C小于3：1；推测铠平鲉和花斑平鲉更适合在夜间活动，而大泷六线鱼和斑头六线鱼属白天活动的鱼类。（3）铠平鲉、花斑平鲉、大泷六线鱼和斑头六线鱼视锥细胞密度最高处分别位于视网膜的腹-颞（V-T）区、腹区（V）、腹-颞（V-T）区和背-颞区（D-T），与各自的生活习性和摄食行为相适应。（4）4种岩礁性鱼类的成熟个体中，铠平鲉的最小分辨角最大，其次为花斑平鲉和大泷六线鱼，斑头六线鱼的最小分辨角最小。分析认为，即使是同样栖息于礁区的鱼类，其视觉特征也存在差异，这或许可以为岩礁区选择性渔具的开发提供一些有益的参考。
2014, 38(3):305-315.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48904
摘要:
通过兼并引物扩增及RACE技术，克隆大菱鲆促黄体激素受体（luteinizing hormone receptor，LHR）基因，分析其相应生物信息学特征和组织表达。结果显示：LHR基因序列全长3 184 bp，编码685个氨基酸，同大西洋庸鲽同源性最高。氨基酸序列分析发现，该基因编码蛋白为疏水性蛋白，相对分子量76.54 ku，理论等电点7.22，存在信号肽序列和跨膜区；亚细胞定位主要在内质网和细胞膜；预测该蛋白含有33个磷酸化位点、5个糖基化位点、6个富含亮氨酸重复序列、7个跨膜保守结构域，二级结构以无规则卷曲为主，三级结构其结构域呈α螺旋状构象；蛋白功能预测表明，LHR主要在辅助、运载、翻译和代谢调节过程中发挥关键作用。组织表达分析表明，LHR基因除在卵巢大量表达外，在其他非性腺组织也有表达，尤其是在肝脏表达较高。上述结果为深入探讨LHR基因在大菱鲆性腺发育过程中的生物学功能奠定了遗传信息基础，也为研究其他海水养殖鱼类生殖调控提供重要参考。
通过兼并引物扩增及RACE技术，克隆大菱鲆促黄体激素受体（luteinizing hormone receptor，LHR）基因，分析其相应生物信息学特征和组织表达。结果显示：LHR基因序列全长3 184 bp，编码685个氨基酸，同大西洋庸鲽同源性最高。氨基酸序列分析发现，该基因编码蛋白为疏水性蛋白，相对分子量76.54 ku，理论等电点7.22，存在信号肽序列和跨膜区；亚细胞定位主要在内质网和细胞膜；预测该蛋白含有33个磷酸化位点、5个糖基化位点、6个富含亮氨酸重复序列、7个跨膜保守结构域，二级结构以无规则卷曲为主，三级结构其结构域呈α螺旋状构象；蛋白功能预测表明，LHR主要在辅助、运载、翻译和代谢调节过程中发挥关键作用。组织表达分析表明，LHR基因除在卵巢大量表达外，在其他非性腺组织也有表达，尤其是在肝脏表达较高。上述结果为深入探讨LHR基因在大菱鲆性腺发育过程中的生物学功能奠定了遗传信息基础，也为研究其他海水养殖鱼类生殖调控提供重要参考。
2014, 38(3):410-416.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48914
摘要:
为优选青岛市沿海中国明对虾的港湾增殖放流点，本实验于2010年6月至9月采用拖网调查，对鳌山湾渔业资源生物背景、放流中国明对虾的资源量和生长特性进行了研究。结果显示：（1）5个航次拖网调查的渔获物组成中与中国明对虾食性类似的口虾蛄捕获量最大，占总捕获量的46.66%，中国明对虾的天敌虎鱼和鲬的捕获量很少，占总捕获量的1.28%。浮游植物生物水平评价等级为Ⅴ级；（2）中国明对虾的资源调查回捕率约为0.10%，偏低，港口码头走访调查回捕率为1.20%，属正常值，但相对偏低；（3）中国明对虾生长速度较快，具有雌雄差异，最大体质量日增长量分别为0.88和0.47 g。生长初期雄虾生长较快，但后期雌虾生长速度更快，且能达到更大的规格，其渐近体质量与体长雌虾为：L∞=200.83 mm、W∞=104.05 g；雄虾为：L∞=172.64 mm、W∞=38.81 g。开捕时雌雄中国明对虾的平均体质量分别为43.25和34.20 g左右，已达到捕捞规格。鳌山湾渔业资源种类组成、浮游植物生物水平等级、放流中国明对虾的资源量、生长特性等重要数据证实鳌山湾适合中国明对虾的放流。
为优选青岛市沿海中国明对虾的港湾增殖放流点，本实验于2010年6月至9月采用拖网调查，对鳌山湾渔业资源生物背景、放流中国明对虾的资源量和生长特性进行了研究。结果显示：（1）5个航次拖网调查的渔获物组成中与中国明对虾食性类似的口虾蛄捕获量最大，占总捕获量的46.66%，中国明对虾的天敌虎鱼和鲬的捕获量很少，占总捕获量的1.28%。浮游植物生物水平评价等级为Ⅴ级；（2）中国明对虾的资源调查回捕率约为0.10%，偏低，港口码头走访调查回捕率为1.20%，属正常值，但相对偏低；（3）中国明对虾生长速度较快，具有雌雄差异，最大体质量日增长量分别为0.88和0.47 g。生长初期雄虾生长较快，但后期雌虾生长速度更快，且能达到更大的规格，其渐近体质量与体长雌虾为：L∞=200.83 mm、W∞=104.05 g；雄虾为：L∞=172.64 mm、W∞=38.81 g。开捕时雌雄中国明对虾的平均体质量分别为43.25和34.20 g左右，已达到捕捞规格。鳌山湾渔业资源种类组成、浮游植物生物水平等级、放流中国明对虾的资源量、生长特性等重要数据证实鳌山湾适合中国明对虾的放流。
2014, 38(3):316-324.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48900
摘要:
应用引物退火控制技术（ACP）筛选尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因，寻找与雌雄鱼肌肉生长发育相关的候选基因。本实验从同等条件下养殖的尼罗罗非鱼群体中随机选取雌、雄鱼各5尾组成RNA池，采用引物退火控制技术，分析了两组个体肌肉组织差异表达基因。利用20对随机引物差异显示扩增，共获得8条ESTs，其中5个已知的ESTs分别为转录变体3（LOC100691543）、60S核糖体蛋白（RL3）、小白蛋白β样蛋白、肌型肌酸激酶M2-CK和转录因子Sox4，其余3个为未知的ESTs。实时定量PCR分析各差异表达基因在尼罗罗非鱼雌雄肌肉组织中的表达发现，8个差异表达基因中转录变体3与ACP6-Y在尼罗罗非鱼雄鱼肌肉组织中的表达均极显著高于雌鱼（P<0.01），ACP3-X、60S核糖体蛋白（RL3）、小白蛋白β样蛋白、ACP15-X、肌型肌酸激酶M2-CK与转录因子Sox4在尼罗罗非鱼雌鱼肌肉组织中的表达均极显著高于雄鱼（P<0.01）。结果表明，应用引物退火控制技术筛选获得了8个可能参与了雌雄鱼肌肉生长发育调控的ESTs，为进一步筛选雌雄鱼肌肉生长发育相关候选基因奠定了基础。
应用引物退火控制技术（ACP）筛选尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因，寻找与雌雄鱼肌肉生长发育相关的候选基因。本实验从同等条件下养殖的尼罗罗非鱼群体中随机选取雌、雄鱼各5尾组成RNA池，采用引物退火控制技术，分析了两组个体肌肉组织差异表达基因。利用20对随机引物差异显示扩增，共获得8条ESTs，其中5个已知的ESTs分别为转录变体3（LOC100691543）、60S核糖体蛋白（RL3）、小白蛋白β样蛋白、肌型肌酸激酶M2-CK和转录因子Sox4，其余3个为未知的ESTs。实时定量PCR分析各差异表达基因在尼罗罗非鱼雌雄肌肉组织中的表达发现，8个差异表达基因中转录变体3与ACP6-Y在尼罗罗非鱼雄鱼肌肉组织中的表达均极显著高于雌鱼（P<0.01），ACP3-X、60S核糖体蛋白（RL3）、小白蛋白β样蛋白、ACP15-X、肌型肌酸激酶M2-CK与转录因子Sox4在尼罗罗非鱼雌鱼肌肉组织中的表达均极显著高于雄鱼（P<0.01）。结果表明，应用引物退火控制技术筛选获得了8个可能参与了雌雄鱼肌肉生长发育调控的ESTs，为进一步筛选雌雄鱼肌肉生长发育相关候选基因奠定了基础。
2014, 38(3):417-425.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48961
摘要:
为分析和掌握巢湖生态系统结构与功能的特征参数，结合2007—2010年巢湖渔业资源调查数据，应用Ecopath with Ecosim 6.1软件构建了巢湖生态系统的食物网模型。模型由16个功能组组成，包括初级生产者、主要鱼类、无脊椎动物和有机碎屑等。结果显示，巢湖生态系统食物网主要由4个整合营养级构成，系统规模总流量、总生产量和总消耗量都较大，分别为41 003.08、17 937.42和4 486.67 t/（km2·a）；能量流动主要发生在Ⅱ、Ⅲ营养级间；参照Odum的生态系统成熟程度判定指标发现，巢湖生态系统高的生产量和呼吸比值（TPP/TR）和净初级生产量（NPP），以及较低的系统连接指数（CI）、系统杂食指数（SOI）、Finn's循环指数（FCI）和Finn's平均路径长度（FMPL）都表明：巢湖生态系统结构与功能的特征参数远没有达到成熟生态系统的标准，且劣于富营养化的太湖生态系统。从生态系统结构分析发现，导致巢湖生态系统退化的关键原因是浮游植物生物量、生产量过高，被生态系统利用的效率极低，从而导致生物多样性下降、食物网趋于简单、能量流动不畅。
为分析和掌握巢湖生态系统结构与功能的特征参数，结合2007—2010年巢湖渔业资源调查数据，应用Ecopath with Ecosim 6.1软件构建了巢湖生态系统的食物网模型。模型由16个功能组组成，包括初级生产者、主要鱼类、无脊椎动物和有机碎屑等。结果显示，巢湖生态系统食物网主要由4个整合营养级构成，系统规模总流量、总生产量和总消耗量都较大，分别为41 003.08、17 937.42和4 486.67 t/（km2·a）；能量流动主要发生在Ⅱ、Ⅲ营养级间；参照Odum的生态系统成熟程度判定指标发现，巢湖生态系统高的生产量和呼吸比值（TPP/TR）和净初级生产量（NPP），以及较低的系统连接指数（CI）、系统杂食指数（SOI）、Finn's循环指数（FCI）和Finn's平均路径长度（FMPL）都表明：巢湖生态系统结构与功能的特征参数远没有达到成熟生态系统的标准，且劣于富营养化的太湖生态系统。从生态系统结构分析发现，导致巢湖生态系统退化的关键原因是浮游植物生物量、生产量过高，被生态系统利用的效率极低，从而导致生物多样性下降、食物网趋于简单、能量流动不畅。
2014, 38(3):325-332.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48937
摘要:
为深入了解鲤珠蛋白家族的基因组成和表达模式，及其与低氧适应能力的相关性，本实验通过鲤基因组框架图比对和全长cDNA文库筛查，获得鲤神经球蛋白（neuroglobin，Ngb）基因完整序列，证实鲤不仅具有独特的脑组织特异表达的II型肌红蛋白（myoglobin-2，Mb-2）基因，也具有Ngb珠蛋白基因，实时荧光定量PCR实验显示，该基因在脑组织特异性表达，并呈现出低氧应答特征。基因结构和系统发生分析表明，鱼类Ngb基因高度保守，鲤Ngb蛋白可能与斑马鱼直系同源蛋白具有相似的结构及功能，而与鲤Mb-2存在明显差异。鲤Ngb基因表达量在两个品系间存在显著差异，耐低氧能力强的散鳞镜鲤Ngb基因表达量高于荷包红鲤抗寒品系。研究表明，鲤Ngb基因可能以与Mb-2基因分工协作的方式共同实现脑组织供氧，执行应对低氧胁迫的神经保护功能，在鲤低氧适应中具有重要作用。
为深入了解鲤珠蛋白家族的基因组成和表达模式，及其与低氧适应能力的相关性，本实验通过鲤基因组框架图比对和全长cDNA文库筛查，获得鲤神经球蛋白（neuroglobin，Ngb）基因完整序列，证实鲤不仅具有独特的脑组织特异表达的II型肌红蛋白（myoglobin-2，Mb-2）基因，也具有Ngb珠蛋白基因，实时荧光定量PCR实验显示，该基因在脑组织特异性表达，并呈现出低氧应答特征。基因结构和系统发生分析表明，鱼类Ngb基因高度保守，鲤Ngb蛋白可能与斑马鱼直系同源蛋白具有相似的结构及功能，而与鲤Mb-2存在明显差异。鲤Ngb基因表达量在两个品系间存在显著差异，耐低氧能力强的散鳞镜鲤Ngb基因表达量高于荷包红鲤抗寒品系。研究表明，鲤Ngb基因可能以与Mb-2基因分工协作的方式共同实现脑组织供氧，执行应对低氧胁迫的神经保护功能，在鲤低氧适应中具有重要作用。
2014, 38(3):426-432.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48814
摘要:
为研究沿海滩涂异育银鲫养殖池塘浮游生物群落周年变化及其与理化因子的关系，2011年每月采集养殖池塘水样，测定相关理化因子。采用18s rDNA PCR-DGGE技术对真核浮游生物群落多样性进行了分析。运用CCA方法分析了真核浮游生物与理化因子的关系。结果表明：TP含量为0.17～1.12 mg/L，7月出现峰值。PO4-P含量为0.04～0.30 mg/L，7月和8月较高。NO2-N含量为0.02～0.57 mg/L，12月最高。NH4+-N含量为0.20～2.37 mg/L，5月出现峰值。NO3-N含量为0.04～10.47 mg/L，11月出现峰值。DGGE结果显示，1—12月共有73条谱带，平均每月谱带数为24.67。5月、6月、8月和9月份多样性指数较高。谱带匹配后聚类分析表明：除3月、7月和11月份外，真核浮游生物变化具有季节性，其中8月、9月和10月聚为一支，4月、5月和6月聚为一支，1月、2月和12月聚为一支。CCA分析表明，温度、TP和NH4+-N与真核浮游生物群落结构组成显著相关，为养殖生态调控和养殖模式优化提供理论依据。
为研究沿海滩涂异育银鲫养殖池塘浮游生物群落周年变化及其与理化因子的关系，2011年每月采集养殖池塘水样，测定相关理化因子。采用18s rDNA PCR-DGGE技术对真核浮游生物群落多样性进行了分析。运用CCA方法分析了真核浮游生物与理化因子的关系。结果表明：TP含量为0.17～1.12 mg/L，7月出现峰值。PO4-P含量为0.04～0.30 mg/L，7月和8月较高。NO2-N含量为0.02～0.57 mg/L，12月最高。NH4+-N含量为0.20～2.37 mg/L，5月出现峰值。NO3-N含量为0.04～10.47 mg/L，11月出现峰值。DGGE结果显示，1—12月共有73条谱带，平均每月谱带数为24.67。5月、6月、8月和9月份多样性指数较高。谱带匹配后聚类分析表明：除3月、7月和11月份外，真核浮游生物变化具有季节性，其中8月、9月和10月聚为一支，4月、5月和6月聚为一支，1月、2月和12月聚为一支。CCA分析表明，温度、TP和NH4+-N与真核浮游生物群落结构组成显著相关，为养殖生态调控和养殖模式优化提供理论依据。
2014, 38(3):333-339.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48878
摘要:
采用qRT-PCR、RACE等方法，获得了拟穴青蟹丝裂原活化蛋白激酶激酶（MAPKK）基因cDNA全长序列。该基因全长1 558 bp，开放阅读框长度为1 224 bp，编码407个氨基酸残基。同源分析显示，该基因编码的蛋白与昆虫的相似性高达70%，推测MAPKK基因在节肢动物具有较高的保守性。经荧光定量PCR检测，MAPKK基因在拟穴青蟹多个组织中有表达，且在脑神经节和卵巢中表达量较高。在拟穴青蟹卵巢发育过程中，MAPKK基因在卵巢发育期（Ⅲ期）表达量最高，发育期为卵母细胞快速生长期，推测MAPKK具有促进卵母细胞快速生长的作用。
采用qRT-PCR、RACE等方法，获得了拟穴青蟹丝裂原活化蛋白激酶激酶（MAPKK）基因cDNA全长序列。该基因全长1 558 bp，开放阅读框长度为1 224 bp，编码407个氨基酸残基。同源分析显示，该基因编码的蛋白与昆虫的相似性高达70%，推测MAPKK基因在节肢动物具有较高的保守性。经荧光定量PCR检测，MAPKK基因在拟穴青蟹多个组织中有表达，且在脑神经节和卵巢中表达量较高。在拟穴青蟹卵巢发育过程中，MAPKK基因在卵巢发育期（Ⅲ期）表达量最高，发育期为卵母细胞快速生长期，推测MAPKK具有促进卵母细胞快速生长的作用。
2014, 38(3):433-442.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.49038
摘要:
为探讨脂肪和蛋白质水平对工业化养殖大西洋鲑相关消化酶活力、免疫及对水质指标的影响，采用3×；2双因素试验设计（3脂肪水平：18%、21%、24%，即F18、F21、F24；2蛋白质水平：38%、48%，即P38、P48），形成6种实验处理的膨化配合颗粒料，每处理3重复，在工业化封闭循环海水养殖（RAS）条件下，选用初重（650.0±45.50） g大西洋鲑720尾进行56 d的养殖实验。结果显示：（1）F21可显著提高大西洋鲑胃、肠、肝脂肪酶活力，比低脂肪分别提高11.52%、14.63%、4.31%；P48使肠、肝胰蛋白酶活力分别提高8.23%、8.33%，且发现其活力水平远高于胃蛋白酶。（2）F18、P48可显著提高肠道AKP酶活力，F18比F21、F24分别提高18.61%、31.70%，P48比P38提高13.69%。（3）F21、F24可显著改善血清的抗氧化能力，F21比F18的SOD活力提高10.32%，同时MDA含量降低4.49%；P48有利于提高血清LZM活力及补体C3含量，P48比P38分别高9.49%、5.93%。（4）低蛋白质水平可显著降低水体中氨氮、硝酸盐的含量，P38比 P48分别降低61.70%、28.36%；提高脂肪水平可降低水体氨氮含量，F21、F24比F18分别降低10.00%、8.20%。研究表明，饲料脂肪和蛋白质水平与消化吸收酶、非特异免疫、养殖水氨氮之间关系特征明显；适当提高脂肪水平有利于提高消化道脂肪酶活力，提高蛋白质水平有利于提高免疫力；低蛋白质和中高脂肪组合可有效降低大西洋鲑的氨氮排泄量。
为探讨脂肪和蛋白质水平对工业化养殖大西洋鲑相关消化酶活力、免疫及对水质指标的影响，采用3×；2双因素试验设计（3脂肪水平：18%、21%、24%，即F18、F21、F24；2蛋白质水平：38%、48%，即P38、P48），形成6种实验处理的膨化配合颗粒料，每处理3重复，在工业化封闭循环海水养殖（RAS）条件下，选用初重（650.0±45.50） g大西洋鲑720尾进行56 d的养殖实验。结果显示：（1）F21可显著提高大西洋鲑胃、肠、肝脂肪酶活力，比低脂肪分别提高11.52%、14.63%、4.31%；P48使肠、肝胰蛋白酶活力分别提高8.23%、8.33%，且发现其活力水平远高于胃蛋白酶。（2）F18、P48可显著提高肠道AKP酶活力，F18比F21、F24分别提高18.61%、31.70%，P48比P38提高13.69%。（3）F21、F24可显著改善血清的抗氧化能力，F21比F18的SOD活力提高10.32%，同时MDA含量降低4.49%；P48有利于提高血清LZM活力及补体C3含量，P48比P38分别高9.49%、5.93%。（4）低蛋白质水平可显著降低水体中氨氮、硝酸盐的含量，P38比 P48分别降低61.70%、28.36%；提高脂肪水平可降低水体氨氮含量，F21、F24比F18分别降低10.00%、8.20%。研究表明，饲料脂肪和蛋白质水平与消化吸收酶、非特异免疫、养殖水氨氮之间关系特征明显；适当提高脂肪水平有利于提高消化道脂肪酶活力，提高蛋白质水平有利于提高免疫力；低蛋白质和中高脂肪组合可有效降低大西洋鲑的氨氮排泄量。
2014, 38(3):340-349.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48952
摘要:
以坛紫菜转录组测序获得的unigene序列为基础，采用RACE（rapid amplification of cDNA ends）技术克隆获得了坛紫菜的两条Hsp90基因序列：PhHsp90-1和PhHsp90-2。序列分析结果表明，PhHsp90-1序列全长2 572 bp，包含一个2 427 bp的开放阅读框，所编码的多肽包含809个氨基酸，分子量为90.2 ku，等电点为4.79，属于Hsp90内质网亚家族（登录号：KF732651）；PhHsp90-2序列全长2 510 bp，包含一个2 280 bp的开放阅读框，所编码的多肽包含760个氨基酸，分子量为86.2 ku，等电点为4.81，属于Hsp90细胞质亚家族（登录号：KF732652）。基因表达水平的定量分析结果表明，高温和失水胁迫对两条PhHsp90基因的表达水平均有显著影响，但在表达模式上存在明显差异。高温胁迫不同时间水平下，两条PhHsp90基因的表达均表现为先上调后下调的趋势；而在失水胁迫下，当失水率小于60%时，两条基因的表达水平均没有发生显著变化，但当失水率大于60%时，两条基因的表达水平均显著上调，说明两条PhHsp90基因均在应答高温胁迫和高度失水胁迫中发挥着重要作用。
以坛紫菜转录组测序获得的unigene序列为基础，采用RACE（rapid amplification of cDNA ends）技术克隆获得了坛紫菜的两条Hsp90基因序列：PhHsp90-1和PhHsp90-2。序列分析结果表明，PhHsp90-1序列全长2 572 bp，包含一个2 427 bp的开放阅读框，所编码的多肽包含809个氨基酸，分子量为90.2 ku，等电点为4.79，属于Hsp90内质网亚家族（登录号：KF732651）；PhHsp90-2序列全长2 510 bp，包含一个2 280 bp的开放阅读框，所编码的多肽包含760个氨基酸，分子量为86.2 ku，等电点为4.81，属于Hsp90细胞质亚家族（登录号：KF732652）。基因表达水平的定量分析结果表明，高温和失水胁迫对两条PhHsp90基因的表达水平均有显著影响，但在表达模式上存在明显差异。高温胁迫不同时间水平下，两条PhHsp90基因的表达均表现为先上调后下调的趋势；而在失水胁迫下，当失水率小于60%时，两条基因的表达水平均没有发生显著变化，但当失水率大于60%时，两条基因的表达水平均显著上调，说明两条PhHsp90基因均在应答高温胁迫和高度失水胁迫中发挥着重要作用。
2014, 38(3):443-448.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48956
摘要:
2011年夏季，我国秦皇岛沿岸海域再次暴发了大面积的微微型浮游植物抑食金球藻褐潮。为了弄清该藻的毒性以及评估其对人们生命健康的影响，本实验以卤虫作为受试生物，在室内条件下测试了该褐潮水体对卤虫的急性毒性及卤虫对该藻的摄食作用，并以室内纯种培养的抑食金球藻对小白兔进行急性皮肤刺激和眼刺激实验，对小白鼠进行急性经口毒性实验。结果表明，抑食金球藻褐潮水体对卤虫无急性毒性，卤虫能以抑食金球藻为食，摄食率随着摄食藻密度的升高而上升。抑食金球藻藻液对实验兔的皮肤和眼睛无明显刺激作用，对小白鼠无急性毒性作用。该藻暴发褐潮时，对人们的生命健康安全影响较小。
2011年夏季，我国秦皇岛沿岸海域再次暴发了大面积的微微型浮游植物抑食金球藻褐潮。为了弄清该藻的毒性以及评估其对人们生命健康的影响，本实验以卤虫作为受试生物，在室内条件下测试了该褐潮水体对卤虫的急性毒性及卤虫对该藻的摄食作用，并以室内纯种培养的抑食金球藻对小白兔进行急性皮肤刺激和眼刺激实验，对小白鼠进行急性经口毒性实验。结果表明，抑食金球藻褐潮水体对卤虫无急性毒性，卤虫能以抑食金球藻为食，摄食率随着摄食藻密度的升高而上升。抑食金球藻藻液对实验兔的皮肤和眼睛无明显刺激作用，对小白鼠无急性毒性作用。该藻暴发褐潮时，对人们的生命健康安全影响较小。
2014, 38(3):449-456.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48945
摘要:
为研究草鱼呼肠孤病毒（GCRV）HZ08株S10基因节段编码蛋白的可能功能，采用PCR方法扩增草鱼呼肠孤病毒HZ08株S10基因节段，并把该基因节段克隆至表达载体pET-32a（+），获得的重组表达载体pET-32a-S10转化到大肠杆菌BL21（DE3）菌株，用IPTG诱导表达，表达产物通过SDS-PAGE分析鉴定后，再通过变性、过Ni柱纯化、透析复性纯化获得目的蛋白。然后用纯化的重组蛋白免疫昆明小白鼠，制得多克隆抗体，用间接ELISA方法测定抗体效价，用Western blot和IFA（间接免疫荧光试验）鉴定抗体特异性。结果表明，SDS-PAGE分析表达的重组蛋白约为53 ku，大小与预期相符，目的蛋白主要存在于包涵体中；过Ni柱纯化、透析复性纯化后的重组蛋白纯度可达97.4%；间接ELISA测得制备的多克隆抗体效价约为1：106，Western blot和IFA结果显示，制备的多克隆抗体能识别HZ08毒株，表明S10编码蛋白为GCRV-HZ08株的结构蛋白。
为研究草鱼呼肠孤病毒（GCRV）HZ08株S10基因节段编码蛋白的可能功能，采用PCR方法扩增草鱼呼肠孤病毒HZ08株S10基因节段，并把该基因节段克隆至表达载体pET-32a（+），获得的重组表达载体pET-32a-S10转化到大肠杆菌BL21（DE3）菌株，用IPTG诱导表达，表达产物通过SDS-PAGE分析鉴定后，再通过变性、过Ni柱纯化、透析复性纯化获得目的蛋白。然后用纯化的重组蛋白免疫昆明小白鼠，制得多克隆抗体，用间接ELISA方法测定抗体效价，用Western blot和IFA（间接免疫荧光试验）鉴定抗体特异性。结果表明，SDS-PAGE分析表达的重组蛋白约为53 ku，大小与预期相符，目的蛋白主要存在于包涵体中；过Ni柱纯化、透析复性纯化后的重组蛋白纯度可达97.4%；间接ELISA测得制备的多克隆抗体效价约为1：106，Western blot和IFA结果显示，制备的多克隆抗体能识别HZ08毒株，表明S10编码蛋白为GCRV-HZ08株的结构蛋白。
2014, 38(3):350-355.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48827
摘要:
通过测定卵的直径、卵粒质量、受精率和孵化率系列指标以及精子的激活率、快速运动时间和寿命系列指标对人工驯养子一代中华鲟配子进行质量评价，并通过该批受精卵孵出的子二代系列生长指标进行其发育状况分析。结果显示，子一代所产卵子形态饱满，卵径平均3.71 mm，小于自然繁殖群体。与历年在本基地养殖的自然繁殖群体统计资料相比，其受精率（60.1%）和孵化率（36.8%）处在中等偏下的水平。2012年和2013年的精子活力监测结果发现，子一代精子有效运动时间（漩涡运动+快速运动）均较野生群体高。表明子一代卵子质量较野生群体有所降低，而精子活力则较野生群体高。与历年该基地集约化养殖系统培育出的子一代中华鲟相比，子二代的生长表现出显著的阶段差异性，其中仔鱼阶段生长较慢，稚鱼和幼鱼阶段生长优势则较明显。研究表明，促进人工驯养条件下的子一代后备亲鱼性腺发育完善，以获得较高质量的配子和子二代，对防止中华鲟种质退化至关重要。
通过测定卵的直径、卵粒质量、受精率和孵化率系列指标以及精子的激活率、快速运动时间和寿命系列指标对人工驯养子一代中华鲟配子进行质量评价，并通过该批受精卵孵出的子二代系列生长指标进行其发育状况分析。结果显示，子一代所产卵子形态饱满，卵径平均3.71 mm，小于自然繁殖群体。与历年在本基地养殖的自然繁殖群体统计资料相比，其受精率（60.1%）和孵化率（36.8%）处在中等偏下的水平。2012年和2013年的精子活力监测结果发现，子一代精子有效运动时间（漩涡运动+快速运动）均较野生群体高。表明子一代卵子质量较野生群体有所降低，而精子活力则较野生群体高。与历年该基地集约化养殖系统培育出的子一代中华鲟相比，子二代的生长表现出显著的阶段差异性，其中仔鱼阶段生长较慢，稚鱼和幼鱼阶段生长优势则较明显。研究表明，促进人工驯养条件下的子一代后备亲鱼性腺发育完善，以获得较高质量的配子和子二代，对防止中华鲟种质退化至关重要。
2014, 38(3):356-361.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48955
摘要:
红鲫属鲤亚科，其染色体数目为2n=100；团头鲂属于鲌亚科，其染色体数目为2n=48。在红鲫（♀）×；团头鲂（♂）的远缘杂交F1代中获得了异源三倍体鲫鲂和异源四倍体鲫鲂。本研究对异源三倍体鲫鲂进行了染色体核型分析、染色体FISH杂交检测和性腺结构观察，结果表明：1）异源三倍体鲫鲂的染色体数目为3n=124，染色体核型公式为31m+45sm+26st+22t，染色体组由2套红鲫染色体和1套团头鲂染色体组成；2）利用红鲫特有重复序列为探针进行FISH杂交，红鲫的100条染色体均被标记上荧光信号，而团头鲂的染色体均未标记上荧光信号，异源三倍体鲫鲂中有100条染色体被标记上荧光信号，说明异源三倍体鲫鲂含有2套红鲫来源的染色体组；3）异源三倍体鲫鲂的性腺发育异常，其卵巢型和精巢型性腺发育呈现出退化的特征。研究还讨论了异源三倍体鲫鲂的形成机制。实验结果为鱼类远缘杂交和多倍体鱼研究提供了实验数据，在鱼类遗传育种方面具有重要意义。
红鲫属鲤亚科，其染色体数目为2n=100；团头鲂属于鲌亚科，其染色体数目为2n=48。在红鲫（♀）×；团头鲂（♂）的远缘杂交F1代中获得了异源三倍体鲫鲂和异源四倍体鲫鲂。本研究对异源三倍体鲫鲂进行了染色体核型分析、染色体FISH杂交检测和性腺结构观察，结果表明：1）异源三倍体鲫鲂的染色体数目为3n=124，染色体核型公式为31m+45sm+26st+22t，染色体组由2套红鲫染色体和1套团头鲂染色体组成；2）利用红鲫特有重复序列为探针进行FISH杂交，红鲫的100条染色体均被标记上荧光信号，而团头鲂的染色体均未标记上荧光信号，异源三倍体鲫鲂中有100条染色体被标记上荧光信号，说明异源三倍体鲫鲂含有2套红鲫来源的染色体组；3）异源三倍体鲫鲂的性腺发育异常，其卵巢型和精巢型性腺发育呈现出退化的特征。研究还讨论了异源三倍体鲫鲂的形成机制。实验结果为鱼类远缘杂交和多倍体鱼研究提供了实验数据，在鱼类遗传育种方面具有重要意义。
2014, 38(3):457-463.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48888
摘要:
研究从肉桂中分离纯化出具有抑杀多子小瓜虫活性的化合物。以乙醇为提取剂，用索氏超声提取法从肉桂中提取浸膏，再用石油醚、乙酸乙酯、甲醇为萃取剂，萃取不同有效组分，以不同浓度分别进行杀灭离体多子小瓜虫实验，发现石油醚萃取物的杀虫效果最优。然后对石油醚萃取物采用硅胶层析柱和制备型高效液相色谱进行分离纯化，利用质谱和核磁波谱分析，最终鉴定其杀虫活性成分为肉桂醛；将肉桂醛溶于二甲基亚砜并用二倍梯度稀释法配成不同浓度的药液测试其对离体小瓜虫的杀灭活性。结果表明，100%杀灭滋养体和感染性幼虫的剂量分别为50和8 mg/L，半数有效浓度分别为13.9和1.8 mg/L；使用剂量在50 mg/L可完全抑制小瓜虫包囊孵化。
研究从肉桂中分离纯化出具有抑杀多子小瓜虫活性的化合物。以乙醇为提取剂，用索氏超声提取法从肉桂中提取浸膏，再用石油醚、乙酸乙酯、甲醇为萃取剂，萃取不同有效组分，以不同浓度分别进行杀灭离体多子小瓜虫实验，发现石油醚萃取物的杀虫效果最优。然后对石油醚萃取物采用硅胶层析柱和制备型高效液相色谱进行分离纯化，利用质谱和核磁波谱分析，最终鉴定其杀虫活性成分为肉桂醛；将肉桂醛溶于二甲基亚砜并用二倍梯度稀释法配成不同浓度的药液测试其对离体小瓜虫的杀灭活性。结果表明，100%杀灭滋养体和感染性幼虫的剂量分别为50和8 mg/L，半数有效浓度分别为13.9和1.8 mg/L；使用剂量在50 mg/L可完全抑制小瓜虫包囊孵化。
2014, 38(3):362-370.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48901
摘要:
为系统研究脊尾白虾的性腺发育及组织学特征，采用常规的石蜡切片及H.E染色方法对脊尾白虾的性腺发育及其组织结构进行观察。结果表明，脊尾白虾的雌性生殖系统由卵巢、输卵管及排卵孔组成。卵子发生经历了卵原细胞、卵黄合成前期卵母细胞、内源性卵黄合成期卵母细胞、外源性卵黄合成期卵母细胞，最后发育为成熟的卵母细胞。卵巢发育可分为增殖期、小生长期、大生长期、成熟期及产后恢复期。脊尾白虾雄性生殖系统由精巢、输精管及排精孔组成。精巢由生精小管构成，不同生精小管内精子发育可不同步。精子发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞，最后发育为精子。输精管可分为前、中、后输精管及末端壶腹，精荚在输精管中形成。
为系统研究脊尾白虾的性腺发育及组织学特征，采用常规的石蜡切片及H.E染色方法对脊尾白虾的性腺发育及其组织结构进行观察。结果表明，脊尾白虾的雌性生殖系统由卵巢、输卵管及排卵孔组成。卵子发生经历了卵原细胞、卵黄合成前期卵母细胞、内源性卵黄合成期卵母细胞、外源性卵黄合成期卵母细胞，最后发育为成熟的卵母细胞。卵巢发育可分为增殖期、小生长期、大生长期、成熟期及产后恢复期。脊尾白虾雄性生殖系统由精巢、输精管及排精孔组成。精巢由生精小管构成，不同生精小管内精子发育可不同步。精子发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞，最后发育为精子。输精管可分为前、中、后输精管及末端壶腹，精荚在输精管中形成。
2014, 38(3):371-377.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48971
摘要:
对于贝类选择育种，维系大量家系养殖设施的成本巨大，如果能在贝类早期发育阶段对生长、存活进行筛查，提前舍弃那些存活率低、生长慢的家系，将有助于节约家系育种的成本。本实验通过室内模拟升温，比较了10个稚贝期全同胞家系在不同温度下存活率的差异，并对这10个家系在自然海区的生长、存活进行了一周年连续监测。结果表明：在室内8、13、18和23 ℃ 4个温度梯度下，10个家系经蓄养15～20 d后，18和23 ℃实验组的稚贝存活率差异显著，其中A08和A09家系的存活率最高，即为提前筛选出的耐高温家系；经自然海区一周年养成后，存活的4个家系（A01、A03、A08和A09）的存活率分别为0.9%±0.1%、0.5%±0.1%、34.3%±3.5%和46.5%±5.3%，但家系间壳高差异不显著，表明家系生长与存活无明显相关性；而A08和A09为耐高温家系，这与室内稚贝期升温筛选的结果一致。本实验验证了高温是导致虾夷扇贝夏季大规模死亡的主要原因，并提供了一种在家系稚贝期进行耐高温性提前筛查的方法，将为虾夷扇贝耐高温品系的选育提供参考依据。
对于贝类选择育种，维系大量家系养殖设施的成本巨大，如果能在贝类早期发育阶段对生长、存活进行筛查，提前舍弃那些存活率低、生长慢的家系，将有助于节约家系育种的成本。本实验通过室内模拟升温，比较了10个稚贝期全同胞家系在不同温度下存活率的差异，并对这10个家系在自然海区的生长、存活进行了一周年连续监测。结果表明：在室内8、13、18和23 ℃ 4个温度梯度下，10个家系经蓄养15～20 d后，18和23 ℃实验组的稚贝存活率差异显著，其中A08和A09家系的存活率最高，即为提前筛选出的耐高温家系；经自然海区一周年养成后，存活的4个家系（A01、A03、A08和A09）的存活率分别为0.9%±0.1%、0.5%±0.1%、34.3%±3.5%和46.5%±5.3%，但家系间壳高差异不显著，表明家系生长与存活无明显相关性；而A08和A09为耐高温家系，这与室内稚贝期升温筛选的结果一致。本实验验证了高温是导致虾夷扇贝夏季大规模死亡的主要原因，并提供了一种在家系稚贝期进行耐高温性提前筛查的方法，将为虾夷扇贝耐高温品系的选育提供参考依据。
2014, 38(3):378-384.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48908
摘要:
为了探讨在古老的软骨硬鳞鱼中促性腺激素（GtH）的双重内分泌调节作用，本实验设计用离体灌流的方法研究促黄体素释放激素类似物（LHRH-A）和多巴胺（DA）对施氏鲟脑垂体碎片分泌GtH的影响。引入10、100和1 000 nmol/L 3个浓度的LHRH-A对施氏鲟脑垂体碎片3次脉冲式刺激实验；每次间隔1 h，持续5 min，研究不同剂量LHRH-A对鲟鱼脑垂体释放GtH的作用；用200 nmol/L DA对施氏鲟脑垂体碎片持续2 h灌流后引入5 min的1 000 nmol/L LHRH-A刺激实验，研究DA如何抑制鲟鱼脑垂体释放GtH。每5 min收集一管灌流液，用放射免疫测定法（RIA）检测灌流液中GtH的含量。结果显示，低剂量LHRH-A随着刺激引入脑垂体释放GtH出现波浪式的增加，中、高剂量出现释放延后现象。 LHRH-A在10 nmol/L到1 000 nmol/L范围内对刺激脑垂体释放GtH没有剂量依存关系。DA对施氏鲟脑垂体碎片GtH的分泌没有显著影响，但是可以抑制LHRH-A引起的GtH分泌，即DA不能抑制施氏鲟GtH的基础分泌，而只能抑制LHRH-A诱导的GtH分泌。研究结果证明，在高等硬骨鱼类中存在的双重神经内分泌调节在古老的鲟鱼中也存在。
为了探讨在古老的软骨硬鳞鱼中促性腺激素（GtH）的双重内分泌调节作用，本实验设计用离体灌流的方法研究促黄体素释放激素类似物（LHRH-A）和多巴胺（DA）对施氏鲟脑垂体碎片分泌GtH的影响。引入10、100和1 000 nmol/L 3个浓度的LHRH-A对施氏鲟脑垂体碎片3次脉冲式刺激实验；每次间隔1 h，持续5 min，研究不同剂量LHRH-A对鲟鱼脑垂体释放GtH的作用；用200 nmol/L DA对施氏鲟脑垂体碎片持续2 h灌流后引入5 min的1 000 nmol/L LHRH-A刺激实验，研究DA如何抑制鲟鱼脑垂体释放GtH。每5 min收集一管灌流液，用放射免疫测定法（RIA）检测灌流液中GtH的含量。结果显示，低剂量LHRH-A随着刺激引入脑垂体释放GtH出现波浪式的增加，中、高剂量出现释放延后现象。 LHRH-A在10 nmol/L到1 000 nmol/L范围内对刺激脑垂体释放GtH没有剂量依存关系。DA对施氏鲟脑垂体碎片GtH的分泌没有显著影响，但是可以抑制LHRH-A引起的GtH分泌，即DA不能抑制施氏鲟GtH的基础分泌，而只能抑制LHRH-A诱导的GtH分泌。研究结果证明，在高等硬骨鱼类中存在的双重神经内分泌调节在古老的鲟鱼中也存在。
2014, 38(3):385-399.
DOI: 10.3724/SP.J.1231.2014.48806
摘要:
为更好地了解翡翠贻贝血淋巴细胞的免疫功能和拓展该贝类在环境免疫学中的应用，本研究调查了其血淋巴细胞亚群分类，并运用流式细胞术分析了各个亚群的相关免疫功能。结果显示，在翡翠贻贝的血淋巴中主要存在3种血淋巴细胞，包括粒细胞、半粒细胞（分大小2种）和透明细胞。粒细胞占细胞总数的40.4%±8.4%，直径（7.49±1.32） μm，细胞内部充满颗粒；半粒细胞占34.6%±9.4%，直径（12.45±2.21） μm，内部含有部分颗粒，其中小半粒细胞直径（6.64±1.05） μm；透明细胞占15.6%±4.8%，直径（4.69±1.01） μm，细胞内部基本无颗粒。流式细胞分析显示，粒细胞在吞噬作用上最为活跃，粒细胞和半粒细胞在非特异性酯酶和活性氧分子产量上没有差异，均高于透明细胞。透明细胞在吞噬活性、酶活性和活性氧分子产量上均显著低于其他两类细胞，且细胞死亡率显著高于其他两类细胞。流式细胞术显示，在翡翠贻贝中，粒细胞是参与免疫防御的主要血淋巴细胞。
为更好地了解翡翠贻贝血淋巴细胞的免疫功能和拓展该贝类在环境免疫学中的应用，本研究调查了其血淋巴细胞亚群分类，并运用流式细胞术分析了各个亚群的相关免疫功能。结果显示，在翡翠贻贝的血淋巴中主要存在3种血淋巴细胞，包括粒细胞、半粒细胞（分大小2种）和透明细胞。粒细胞占细胞总数的40.4%±8.4%，直径（7.49±1.32） μm，细胞内部充满颗粒；半粒细胞占34.6%±9.4%，直径（12.45±2.21） μm，内部含有部分颗粒，其中小半粒细胞直径（6.64±1.05） μm；透明细胞占15.6%±4.8%，直径（4.69±1.01） μm，细胞内部基本无颗粒。流式细胞分析显示，粒细胞在吞噬作用上最为活跃，粒细胞和半粒细胞在非特异性酯酶和活性氧分子产量上没有差异，均高于透明细胞。透明细胞在吞噬活性、酶活性和活性氧分子产量上均显著低于其他两类细胞，且细胞死亡率显著高于其他两类细胞。流式细胞术显示，在翡翠贻贝中，粒细胞是参与免疫防御的主要血淋巴细胞。
