南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室
国家科技攻关项目
Key Lab of Animal Disease Diagnostic & Immunology of Ministry of Agriculture, Nanjing Agriculture University, Nanjing 210095, China
以携带质粒pAM120(Apr、Tcr/Tn916)的大肠杆菌CG120株为供体菌,与受体菌嗜水气单胞菌J-1株,采用滤膜接合法进行接合转移,在选择平板(含Tc、cfz和脱脂奶)上进行筛选,筛选出6株蛋白酶缺失株(ECPase-),ECPase-菌株其生长速度,对正常鲫血清的抗性降低,用脱脂奶平板法及底物法检测,蛋白酶产量明显降低。与亲本J-1株相比,突变株致病力降低,对鲫的半数致死量大于108(J-1株对鲫的半数致死量为5×103)。用ECPase-突变株MJ-1株的18h培养物(5×106CFU)接种健康鲫,不产生亲本J-1株引起的病变及死亡。用MJ-I活菌免疫鲫,在第5周产生较高的凝集抗体,且对强毒株J-1的攻击有保护作用。表明蛋白酶是嗜水气单胞菌的一个重要的毒力因子,ECPase-突变株仍具有免疫原性。
储卫华.筛选用转座子Tn916诱变的具有_省略_疫原性的嗜水气单胞菌蛋白酶缺失株[J].水产学报,2001,25(3):